[发明专利]用于调节铁稳态的组合物及其使用方法

说明书

相关申请

本申请要求2011年1月19日提交的美国临时专利申请号61/434,405的优先权，该临时专利申请的全文通过引用纳入本文。

技术领域

本公开总体涉及铁稳态紊乱的治疗、预防和改善，尤其与贫血的管理相关。本公开更具体地涉及血幼素(hemojuvelin)-免疫球蛋白Fc结构域融合蛋白及由其衍生的变体、衍生物和肽模拟物以及利用这些组合物改变人体内的血清铁、血清血红蛋白和/或血细胞比容水平的方法。

背景技术

铁是几乎每种有机体的生长和生存所需要的必需元素。红血球(RBC)含有血红蛋白(Hb)，一种红色的、富含铁的蛋白，其从肺部携带氧气至身体的所有肌肉和器官，在这些肌肉和器官中血红蛋白反应以提供身体正常活动所需的能量。当红血球数目或它们含有的血红蛋白数量降至低于正常水平时，身体接收到比其发挥正常功能所需更少的氧气、产生更少的能量。这种情况通常称为贫血。婴儿和儿童贫血的常见原因是铁缺乏。美国多达20％的儿童以及发展中国家中80％的儿童在18岁以前的某个时间会患有贫血。Martin，P.L.等，The Anemias，Principles and Practices of Pediatrics(儿科贫血、原理与实践)，1657(Lippincott1994，第二版)。

哺乳动物中，铁平衡主要在十二指肠吸收膳食中的铁这个水平调节。在人类中，遗传性血色素沉着病(HH)是由膳食铁过量吸收引起的一种常见的常染色体隐性遗传疾病，导致血浆和多个器官(尤其包括胰腺、肝脏、和皮肤)中铁超负荷，并由于铁沉积而引起这些器官和组织的损伤。

青少年血色素沉着病是一种由编码主要的铁调节激素铁调素(HAMP)和血幼素(HFE2)的基因突变而引起的铁超负荷紊乱(Roetto，A.，等.2003.Nut.Genet.33：21-22；Papanikolaou，G.，等2004.Nut.Genet.36：77-82.)。已证明血幼素是骨形态发生蛋白(BMP)的辅助受体，血幼素介导的BMP信号调节铁调素表达和铁代谢(Babitt，J.L.，等2006.Nat.Genet.38：531-539；Babitt，J.L.，等.2007.J Clin Invest.117：1933-1939.)。然而，铁调素在体内的内源BMP调节子是未知的。

血幼素(也称为RGMc)是排斥导向分子(Repulsive Guidance Molecules)蛋白家族的成员，该家族包括RGMa和DRAGON(RGMb)，它们有50-60％的氨基酸同一性(Samad，T.A.，等2004.J.Neurosci.24：2027-2036.)。

需要一种成本有效的、高效的方法来调节铁调素表达和铁代谢。

发明内容

本公开提供血幼素(“HJV”)-免疫球蛋白Fc结构域融合蛋白。本公开还提供利用这些蛋白治疗铁稳态紊乱的方法。HJV可以是哺乳动物HJV。更具体地，HJV可以是小鼠或人HJV。

本公开还提供组合物，该组合物含有与SEQ ID NO：9的序列95％相同的融合蛋白或由其衍生的变体、衍生物或肽模拟物。一种实施方式中，所述融合蛋白或由其衍生的变体、衍生物或肽模拟物的经尺寸排阻色谱确定的纯度至少为98％。另一种实施方式中，所述融合蛋白或由其衍生的变体、衍生物或肽模拟物是糖基化的。某些实施方式中，SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.9的天冬酰胺83、天冬酰胺178和天冬酰胺337是N-糖基化位点。在该实施方式的一个方面，糖基化模式是哺乳动物糖基化模式。具体而言，糖基化模式来自中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系。

另一种实施方式中，所述融合蛋白或由其衍生的变体、衍生物或肽模拟物的N-末端氨基酸是谷氨酰胺。在该实施方式的一个方面，所述融合蛋白或由其衍生的变体、衍生物或肽模拟物的N-末端是QCKILRCNAE(SEQ ID NO：10)。另一种实施方式中，N-末端片段可以是来自SEQ ID NO：1或9的头150个氨基酸的任何片段。