[发明专利]血小板分析系统

权利要求书

1.诊断患者的血清或血浆样品中HIT(肝素诱导的血小板减少症)的方法，所述方法包括：

阶段A，包括：

温育由以下组成的第一PI(患者1)样品：患者的样品的第一等分试样与第一健康个体的PRP，和生理相容缓冲液，条件是缓冲液既不含有钙也不含有镁离子；

温育由以下组成的第一PIH(使用肝素的患者1)样品：患者的样品的第二等分试样与所述PRP，肝素和缓冲液；

温育由以下组成的第一NC(正常对照)样品：健康个体的血浆或血清样品的第一等分试样与所述PRP，和缓冲液；

温育由以下组成的第一NCH(使用肝素的正常对照)：健康个体的血浆或血清的第二等分试样与所述PRP，肝素和缓冲液；

阶段B，包括：

温育由以下组成的第二PI样品：第一PI样品的等分试样，由以下组成的第二PIH样品：第一PIH样品的等分试样，和由以下组成的第二NC样品：第一NC样品的等分试样，和由以下组成的第二NCH样品：第一NCH样品的等分试样，每个具有：第一标记，第一标记能够同时标记肝素激活和非肝素激活血小板，第二标记，第二标记能够标记由肝素激活的血小板，和缓冲液；

阶段C，包括：

在每个第二样品中，通过测量第一标记测量第二样品中每一个的类似量的血小板；

在每个所述类似量的血小板中，通过测量由肝素激活的血小板上的第二标记的量，测量肝素激活的血小板的量；

计算以下之间的差：来自第二PIH样品的激活的血小板的量和来自第二PI样品的激活血小板的量之间，和来自第二NCH样品的激活血小板的量和来自第二NC样品的激活血小板的量之间，和

比较所述第二PIH和第二PI样品的所述差，和所述第二NCH和所述第二NC样品的所述差，

其中当所述第二PIH和第二PI样品的所述差显著大于所述第二NCH和所述第二NC样品的所述差时，患者的样品中诊断为HIT。

2.根据权利要求1所述的方法，选择所述第二PIH和第二PI样品的所述差是比所述NCH和所述第二NC样品的所述差大至少2.5倍。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中第一标记是血小板受体GPIIb/IIIa的标记。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其中第二标记是由肝素激活的血小板表达的p-选择素CD62p的荧光标记的单克隆抗体，该方法包括通过结合到激活血小板的第二标记测量荧光的强度。

5.根据权利要求4所述的方法，其中肝素激活的血小板的量每个通过每个类似量的总血小板群的所述第二标记平均总荧光测量。

6.根据权利要求4所述的方法，进一步包括：

通过设定标志物在2.5%(正态分布的2SD)的类似量的NC的荧光测量的高-CD62p-荧光端上，计算激活血小板%；

在所述高–CD62p荧光端，计算PIH中激活血小板%和PI中激活血小板%之间的读数差，和NCH中激活血小板%和NC中激活血小板%之间的读数差，和

比较PIH和PI与NCH和NC样品的所述差，其中阳性结果是PIH和PI的差显著大于NCH和NC差。

7.根据权利要求6所述的方法，其中PIH和PI的差比NCH和NC差大超过2.5倍。

8.根据权利要求1或2所述的方法，其中血浆或血清样品不多于10μL。

9.根据权利要求1或2所述的方法，其中阶段B进一步包括：温育由以下组成的TRAP样品：TRAP、第一标记、第二标记、和缓冲液，和阶段C进一步包括测量TRAP样品中的激活血小板的量。