[发明专利]纤维糊精和β-D-葡萄糖的增强型发酵

权利要求书

1.一种宿主细胞，包括：

a）编码一种或多种纤维糊精转运子的重组DNA；

b）编码具有葡萄糖变旋酶活性的一种或多种多肽的重组DNA；

其中，当在含纤维二糖的培养基中生长时，所述宿主细胞比缺乏所述编码具有葡萄糖变旋酶活性的一种或多种多肽的重组DNA的相应宿主细胞消耗更多的纤维二糖分子。

2.根据权利要求1所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞还包括编码一种或多种β-葡萄糖苷酶的重组DNA。

3.根据权利要求1或2所述的宿主细胞，其特征在于，所述具有葡萄糖变旋酶活性的多肽为含有选自SEQ ID NOs:17,19,21和23的氨基酸序列的多肽。

4.根据权利要求1或2所述的宿主细胞，其特征在于，所述具有葡萄糖变旋酶活性的多肽为含有选自SEQ ID NOs:28-32的氨基酸序列的多肽。

5.含纤维二糖的混合物的发酵方法，该方法包括：

a）将所述含纤维二糖的混合物与权利要求1至4中任意一项所述的宿主细胞接触，和

b）在支持发酵的条件下，孵化该宿主细胞。

6.含纤维二糖的混合物的发酵方法，该方法包括：

a）提供宿主细胞，其中该宿主细胞包括：

i）编码一种或多种纤维糊精转运子的重组DNA；

ii）编码具有葡萄糖变旋酶活性的一种或多种多肽的重组DNA；和

b）在培养基中培养宿主细胞，以使编码该一种或多种纤维糊精转运子的和编码具有葡萄糖变旋酶活性的一种或多种多肽的重组DNA表达出来，其中编码具有葡萄糖变旋酶活性的一种或多种多肽的重组DNA的表达导致：与缺乏该编码具有葡萄糖变旋酶活性的一种或多种多肽的重组DNA的相应宿主细胞相比，细胞对纤维二糖的消耗增加。

7.一种用于增加化学品产量的方法，该方法包括：

a）提供宿主细胞，其中该宿主细胞包括：

i）编码一种或多种纤维糊精转运子的重组DNA；

ii）编码具有葡萄糖变旋酶活性的一种或多种多肽的重组DNA；和

b）在培养基中培养宿主细胞，以使编码该一种或多种纤维糊精转运子的和编码具有葡萄糖变旋酶活性的一种或多种多肽的重组DNA表达出来，其中编码具有葡萄糖变旋酶活性的一种或多种多肽的重组DNA的表达导致：与缺乏该编码具有葡萄糖变旋酶活性的一种或多种多肽的重组DNA的相应宿主细胞相比，由该细胞生产的化学品的产量增加。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述化学品为醇。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述醇选自乙醇、正丙醇、正丁醇、异丁醇、3-甲基-1-丁醇、2-甲基-1-丁醇、3-甲基-1-戊醇、辛醇。

10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述化学品为萜类化合物、聚酮化合物、脂肪酸、脂肪酸衍生物、或有机酸。

11.用于增加细胞的生长率的方法，该方法包括：

a）提供宿主细胞，其中该宿主细胞包括：

i）编码一种或多种纤维糊精转运子的重组DNA；

ii）编码具有葡萄糖变旋酶活性的一种或多种多肽的重组DNA；和

b）在培养基中培养宿主细胞，以使编码该一种或多种纤维糊精转运子的和编码具有葡萄糖变旋酶活性的一种或多种多肽的重组DNA表达出来，其中编码具有葡萄糖变旋酶活性的一种或多种多肽的重组DNA的表达导致：与缺乏编码该具有葡萄糖变旋酶活性的一种或多种多肽的重组DNA的相应宿主细胞相比，细胞的生长率增加。

12.根据权利要求6至11中任一项所述的方法，其特征在于，所述宿主细胞还包括编码一种或多种β-葡萄糖苷酶的重组DNA。

13.根据权利要求6至12中任一项所述的方法，其特征在于，所述具有葡萄糖变旋酶活性的多肽为含有选自SEQ ID NOs:17,19,21和23的氨基酸序列的多肽。

14.根据权利要求6至12中任一项所述的方法，其特征在于，所述具有葡萄糖变旋酶活性的多肽为含有选自SEQ ID NOs:28-32的氨基酸序列的多肽。