[发明专利]脂蛋白复合物及其制备和用途

权利要求书

1.制备脂蛋白复合物的方法，包括：

(a)将包含脂质成分和蛋白成分的起始混悬液从第一温度范围内的温度冷却至第二温度范围内的温度，所述第一温度范围包括不低于所述蛋白组分的转变温度5℃和不高于所述蛋白组分的转变温度5℃的温度，所述第二温度范围包括不低于所述脂质组分的转变温度5℃和不高于所述脂质组分的转变温度5℃的温度，其中；

(i)所述脂质成分基本上由通过均质形成的脂质颗粒构成；

(ii)所述蛋白成分基本上由未经过均质的脂质结合肽和/或脂质结合蛋白组成；

(iii)起始混悬液是包括以下的过程的产物：将脂质组分与蛋白组分相组合；

(iv)起始混悬液具有2:1至200:1的脂质:蛋白质摩尔比；和

(v)起始混悬液中的脂质包含99:1至95:5重量:重量比的中性磷脂和带负电荷的磷脂；

(vi)中性和负电荷磷脂的酰基链在长度上含有14至20个碳；

(b)将所述(a)的经冷却的混悬液从在所述第二温度范围内的温度加热至所述第一温度范围内的温度；

(c)将所述(b)的经加热的混悬液从在所述第一温度范围内的温度冷却至所述第二温度范围内的温度；和

(d)重复步骤(b)和(c)，直至至少80％的蛋白组分并入到脂蛋白复合物中，从而形成脂蛋白复合物。

2.制备脂蛋白复合物的方法，包括：

(a)将包含脂质成分和蛋白成分的起始混悬液从第一温度范围内的温度冷却至第二温度范围内的温度，所述第一温度范围包括不低于所述蛋白组分的转变温度5℃和不高于所述蛋白组分的转变温度5℃的温度，所述第二温度范围包括不低于所述脂质组分的转变温度5℃和不高于所述脂质组分的转变温度5℃的温度，其中；

(i)所述脂质成分基本上由通过均质形成的脂质颗粒构成；

(ii)所述蛋白成分基本上由未经过均质的脂质结合肽和/或脂质结合蛋白和脂质组成，所述脂质为起始悬浮液中的脂质总量的以重量计10％或更少的量；

(iii)起始混悬液是包括以下的过程的产物：将脂质组分与蛋白组分相组合；

(iv)起始混悬液具有2:1至200:1的脂质:蛋白质摩尔比；和

(v)起始混悬液中的脂质包含99:1至95:5重量:重量比的中性磷脂和带负电荷的磷脂；

(b)将所述(a)的经冷却的混悬液从在所述第二温度范围内的温度加热至所述第一温度范围内的温度；

(c)将所述(b)的经加热的混悬液从在所述第一温度范围内的温度冷却至所述第二温度范围内的温度；和

(d)重复步骤(b)和(c)，直至至少80％的蛋白组分并入到脂蛋白复合物中，从而形成脂蛋白复合物。

3.权利要求1或权利要求2的方法，其中重复步骤(b)和(c)直至至少85％的蛋白组分并入到脂蛋白复合物中。

4.权利要求1或权利要求2的方法，其中重复步骤(b)和(c)直至至少90％的蛋白组分并入到脂蛋白复合物中。

5.权利要求1或权利要求2的方法，其中重复步骤(b)和(c)直至至少95％的蛋白组分并入到脂蛋白复合物中。

6.权利要求1或权利要求2的方法，其中重复步骤(b)和(c)至少三次。

7.权利要求1或权利要求2的方法，其中重复步骤(b)和(c)直至获得根据通过凝胶过滤层析所测量直径为4nm至15nm的脂蛋白复合物。

8.权利要求1或权利要求2的方法，其中重复步骤(b)和(c)直至根据由凝胶渗透色谱法中的单峰所反映，所述脂蛋白复合物为至少85％均质的。

9.权利要求1或权利要求2的方法，其中重复步骤(b)和(c)直至根据由凝胶渗透色谱法中的单峰所反映，所述脂蛋白复合物为至少90％均质的。

10.权利要求1或权利要求2的方法，其中重复步骤(b)和(c)直至根据由凝胶渗透色谱法中的单峰所反映，所述脂蛋白复合物为至少95％均质的。