[发明专利]具有纤维二糖水解酶活性的多肽及编码该多肽的多核苷酸有效
申请号: | 201280015346.8 | 申请日: | 2012-01-26 |
公开(公告)号: | CN103517986A | 公开(公告)日: | 2014-01-15 |
发明(设计)人: | N.斯波德斯伯格 | 申请(专利权)人: | 诺维信公司;诺维信股份有限公司 |
主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 史悦 |
地址: | 丹麦*** | 国省代码: | 丹麦;DK |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 具有 纤维 糖水 活性 多肽 编码 多核苷酸 | ||
1.一种具有纤维二糖水解酶活性的分离的多肽,其选自下组:
(a)多肽,其与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少81%,例如至少82%,至少83%,至少84%,至少85%,至少87%,至少90%,至少91%,至少92%,至少93%,至少94%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%,或100%的序列同一性;
(b)多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸在中等严格条件,或中等-高严格条件,或高严格条件,或非常高严格条件下与以下杂交:(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列,(ii)其cDNA序列,或(iii)(i)或(ii)的全长互补物;
(c)多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列或它们的cDNA序列具有至少60%,例如至少65%,至少70%,至少75%,至少80%,至少85%,至少85%,至少90%,至少91%,至少92%,至少93%,至少94%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%,或100%的序列同一性;
(d)SEQ ID NO:2的成熟多肽的在一个或多个位置包含取代、缺失和/或插入的变体;和
(e)(a)、(b)、(c)或(d)的多肽的具有纤维二糖水解酶活性的片段。
2.权利要求1的多肽,其与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少81%,至少82%,至少83%,至少84%,至少85%,至少87%,至少90%,至少91%,至少92%,至少93%,至少94%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%,或100%的序列同一性。
3.权利要求1或2的多肽,其包含或组成为SEQ ID NO:2,或SEQ IDNO:2的成熟多肽。
4.权利要求3的多肽,其中所述成熟多肽是SEQ ID NO:2的氨基酸19至464。
5.权利要求1的多肽,其为SEQ ID NO:2的片段,其中所述片段具有纤维二糖水解酶活性。
6.一种分离的多肽,其包含选自下组的催化域:
(a)催化域,其与SEQ ID NO:2的催化域具有至少81%序列同一性;
(b)催化域,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸与SEQ ID NO:1的催化域编码序列具有至少60%序列同一性;
(c)SEQ ID NO:2的催化域的包含一个或多个(几个)氨基酸取代、缺失和/或插入的催化域变体;和
(d)(a)、(b)或(c)的催化域的具有纤维二糖水解酶活性的片段。
7.权利要求6的多肽,其包含或组成为SEQ ID NO:2的催化域。
8.权利要求7的多肽,其中所述催化域是SEQ ID NO:2的氨基酸105至464。
9.权利要求6-8任一项的多肽,其进一步包含纤维素结合域。
10.一种酶组合物,其包含权利要求1-9任一项的多肽。
11.一种分离的多核苷酸,其编码权利要求1-9任一项的多肽。
12.一种核酸构建体或表达载体,其包含权利要求11的多核苷酸,所述多核苷酸可操作地连接于一个或多个调控序列,所述调控序列指导所述多肽在表达宿主中的产生。
13.一种重组宿主细胞,其包含权利要求11的多核苷酸,所述多核苷酸可操作地连接于一个或多个调控序列,所述调控序列指导所述多肽的产生。
14.一种产生具有纤维二糖水解酶活性的多肽的方法,其包括:
(a)在有助于所述多肽产生的条件下培养权利要求13的宿主细胞;和
(b)回收所述多肽。
15.一种编码信号肽的分离的多核苷酸,所述信号肽包含或组成为SEQ ID NO:2的氨基酸1至18。
16.一种重组宿主细胞,其包含编码蛋白的基因,所述基因可操作地连接于权利要求15的多核苷酸,其中所述基因对于编码所述信号肽的多核苷酸是外源的。
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