[发明专利]免疫球蛋白结构域的工程改造

权利要求书

1.一种组合物，其包含在框架区（FR）包含一个或多个非常规二硫键的免疫球蛋白骨架。

2.权利要求1的组合物，其中所述免疫球蛋白骨架选自V_H或V_L骨架，其中V_H骨架在FR中包含至少一个非常规二硫键，其中所述非常规二硫键在基于Kabat编号的位置49和69处引入的半胱氨酸残基之间形成；所述V_L骨架在FR中包含至少一个非常规二硫键，其中所述非常规二硫键在基于Kabat编号的位置48和64处引入的半胱氨酸残基之间形成。

3.权利要求1的组合物，其中所述骨架是选自单域抗体（sdAb）、scFv、Fab、F(ab）₂或成熟免疫球蛋白的较大抗体蛋白或片段的一部分。

4.权利要求3的组合物，其中所述成熟免疫球蛋白选自IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgE和/或IgM。

5.权利要求1的组合物，其中所述免疫球蛋白骨架是V_H。

6.权利要求5的组合物，其中所述V_H属于V_H3家族。

7.权利要求1的组合物，其中所述免疫球蛋白骨架是V_L。

8.权利要求7的组合物，其中所述V_L属于κ或λ家族。.

9.权利要求1至8任一项的组合物，其中所述一个或多个非常规二硫键是在通过突变引入至FR2和FR3中的半胱氨酸残基之间形成。

10.权利要求5或6的组合物，其中所述半胱氨酸残基在基于Kabat编号的位置49和69处引入。

11.权利要求7或8的组合物，其中所述半胱氨酸残基在基于Kabat编号的位置48和64处引入。

12.权利要求1至11任一项的组合物，其中所述骨架是多聚化的，其中所得到的多聚体至少包含二聚体、三聚体、四聚体、五聚体、六聚体、七聚体或八聚体。

13.权利要求1至12任一项的组合物，其中所述骨架被融合至另一个序列，其中所述另一个序列选自Fc片段、靶向序列、信号序列和纯化标签或它们的任意组合。