[发明专利]抗病毒转基因蚕

说明书

技术领域

本发明涉及使用RNA干扰(RNAi)来抑制转基因昆虫，家蚕(Bombyx mori L.)中的杆状病毒感染(baculoviral infection)。通过基于PiggyBac转座子的载体，我们获得了18株组成型生产针对四种必需病毒基因，即立早基因(immediate early)-1(ie-1)、迟效因子基因(late effector factors)(lef1和3)和p74的双链RNA的转基因蚕纯合子系。

背景技术

家蚕(Bombyx mori L)为具有显著经济价值的主要鳞翅目(lepidopteran)昆虫，其也被认为是用于基因组分析的理想鳞翅目模型体系(Nagaraju J和Goldsmith MR(2002)Silkworm genomics-progress and prospects.Current Science83:415-425；Nagaraju J、Klimenko V和Couble P(2000)The silkworm Bombyx mori,a model genetic system.In Encyclopedia of Genetics,ed.Reeves E.(Fitzroy Dearborn,London),pp.219-239)。除了其用作经济昆虫和遗传工具以外，通过使用基于PiggyBac转座子的载体的成功的种系转基因而增加了蚕的工业应用(Tamura T,Thibert C,Royer C,Kanda T,Abraham E,Kamba M,Komoto N,Thomas JL,Mauchamp B,Chavancy G,Shirk P,Fraser M,Prudhomme JC,Couble P,Toshiki T,Chantal T,Corinne R,Toshio K,Eappen A,Mari K,Natuo K,Jean-Luc T,Bernard M,Gerard C,Paul S,Malcolm F,Jean-Claude P和Pierre C(2000)Germline transformation of the silkworm Bombyx mori L.using a piggyBac transposon-derived vector.Nature Biotechnology18:81-84)。这种鳞翅目昆虫为印度成千上万的农民提供生计，但由于病毒-家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)所引起的严重杆状病毒疾病而影响了他们的收入。将近50%的作物损失是由杆状病毒引起的。在杆状病毒感染周期结束时产生的多角体病毒体的稳固性质帮助病毒感染广泛传播，特别是在夏季和炎热潮湿的季节。因此，对于稳定蚕茧作物和改善丝产量，反过来改善蚕丝业经济，当务之急是开发抗BmNPV蚕株。