[发明专利]改造层粘连蛋白及其利用有效
申请号: | 201280017315.6 | 申请日: | 2012-04-09 |
公开(公告)号: | CN103649112B | 公开(公告)日: | 2017-07-18 |
发明(设计)人: | 关口清俊;谷口征雅;中川诚人 | 申请(专利权)人: | 国立大学法人大阪大学;国立大学法人京都大学 |
主分类号: | C07K14/47 | 分类号: | C07K14/47;C07K14/78;C07K19/00;C12N1/00;C12N5/0735;C12N5/10;C12N15/09 |
代理公司: | 中原信达知识产权代理有限责任公司11219 | 代理人: | 杨青,穆德骏 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 改造 粘连 蛋白 及其 利用 | ||
1.一种改造层粘连蛋白,其特征在于,在层粘连蛋白E8片段的α链的N末端、α链的C末端、β链的N末端以及γ链的N末端的至少1处融合有增殖因子结合分子,其中,层粘连蛋白E8片段是层粘连蛋白α5β1γ1的E8片段或层粘连蛋白α3β3γ2的E8片段,增殖因子结合分子是硫酸乙酰肝素蛋白聚糖。
2.根据权利要求1所述的改造层粘连蛋白,其中,增殖因子结合分子是选自以下(a)~(e)的至少1种以上,
(a)基底膜蛋白聚糖或其包含增殖因子结合位点的片段、
(b)聚集蛋白或其包含增殖因子结合位点的片段、
(c)XVIII型胶原蛋白或其包含增殖因子结合位点的片段、
(d)多配体蛋白聚糖或其包含增殖因子结合位点的片段、
(e)磷脂酰肌醇蛋白聚糖或其包含增殖因子结合位点的片段。
3.根据权利要求1或2所述的改造层粘连蛋白,其中,改造层粘连蛋白来源于人。
4.一种哺乳动物细胞的培养方法,其特征在于,在权利要求1~3中任一项所述的改造层粘连蛋白的存在下进行培养。
5.根据权利要求4所述的培养方法,其中,哺乳动物细胞是ES细胞、iPS细胞或成体干细胞。
6.根据权利要求4或5所述的培养方法,其中,不使用饲养细胞。
7.一种培养基质,其特征在于,包被有权利要求1~3中任一项所述的改造层粘连蛋白。
8.根据权利要求7所述的培养基质,其中,以0.03~25μg/cm2的浓度包被有改造层粘连蛋白。
9.一种iPS细胞的建立方法,其特征在于,包括:在权利要求1~3中任一项所述的改造层粘连蛋白的存在下使核重编程物质与体细胞接触的步骤。
10.根据权利要求9所述的iPS细胞的建立方法,其中,所述核重编程物质包含选自由Oct家族、Sox家族、Klf家族、Lin家族和Glis家族以及编码它们的核酸组成的组中的1种以上的物质。
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