[发明专利]检测针对抗-TNFα药物的自身抗体的测定法

权利要求书

1.用于检测样品中针对抗-TNFα药物的自身抗体的存在或水平，而不会受样品中抗-TNFα药物干扰的方法，所述方法包括：

(a)将样品与酸接触，以解离所述自身抗体和所述抗-TNFα药物预先形成的复合物，其中所述样品具有或者疑似具有针对所述抗-TNFα药物的自身抗体；

(b)解离所述预先形成的复合物后，将所述样品与标记的抗-TNFα药物接触；

(c)中和所述样品中的酸，以形成所述标记的抗-TNFα药物和所述自身抗体的标记的复合物；

(d)将所述标记的复合物进行大小排阻层析，以分离所述标记的复合物；和

(e)检测所述标记的复合物，从而检测所述自身抗体的存在或水平，而不受所述样品中所述抗-TNFα药物的干扰。

2.权利要求1的方法，其中所述抗-TNFα药物选自REMICADE^TM（英利昔单抗）、ENBREL^TM（依他西特）、HUMIRA^TM（阿达木单抗）、（培舍珠单抗）、（戈利木单抗;CNTO 148）及其组合。

3.权利要求1或2的方法，其中针对所述抗-TNFα药物的所述自身抗体选自人抗-嵌合抗体（HACA）、人抗-人源化抗体（HAHA）和人抗-小鼠抗体（HAMA）及其组合。

4.权利要求1-3中任一项的方法，其中所述酸包括有机酸、无机酸或其组合。

5.权利要求4的方法，其中有机酸包括柠檬酸。

6.权利要求1-5中任一项的方法，其中所述样品与约0.1M-约5M浓度的酸接触。

7.权利要求1-6中任一项的方法，其中所述酸通过将一种或多种中和剂加入到样品中来中和。

8.权利要求1-7中任一项的方法，其中步骤(b)还包括将标记的内部对照与所述样品接触。

9.权利要求1-8中任一项的方法，其中所述自身抗体的所述存在或水平在高水平的所述抗-TNFα药物存在的情况下检测。

10.权利要求9的方法，其中所述高水平的所述抗-TNFα药物对应于约10至约100μg/mL的抗-TNFα药物水平。

11.权利要求1-10中任一项的方法，其中所述大小排阻层析是大小排阻-高效液相层析（SE-HPLC）。

12.权利要求1-11中任一项的方法，其中所述样品是血清。

13.权利要求1-12中任一项的方法，其中所述样品获自正在接受用所述抗-TNFα药物的治疗的受试者。

14.权利要求1-13中任一项的方法，其中所述复合物首先洗脱，然后是游离的标记的抗-TNFα药物。

15.权利要求1-14中任一项的方法，其中所述抗-TNFα药物用荧光团或荧光染料标记。

16.用于在正在接受用抗-TNFα药物的疗程的受试者中，优化治疗和/或降低抗-TNFα药物的毒性的方法，所述方法包括：

(a)在来自所述受试者的样品中检测针对所述抗-TNFα药物的自身抗体的存在或水平，而不受样品中所述抗-TNFα药物的干扰，该方法包括：

(i)将所述样品与酸接触，以解离所述自身抗体与所述抗-TNFα药物预先形成的复合物，其中所述样品具有或者疑似具有针对所述抗-TNFα药物的自身抗体；

(ii)解离所述预先形成的复合物后，将所述样品与标记的抗-TNFα药物接触；

(iii)中和所述样品中的所述酸，以形成标记的抗-TNFα药物和所述自身抗体的标记的复合物；

(iv)将所述标记的复合物进行大小排阻层析，以分离所述标记的复合物；和

(v)检测所述标记的复合物，从而检测所述自身抗体的存在或水平，而不受所述样品中所述抗-TNFα药物的干扰；和

(b)基于所述自身抗体的存在或水平，测定用于所述受试者的所述疗程的后续剂量或者确定是否应当将不同的疗程施用给受试者，

从而优化治疗和/或降低针对所述抗-TNFα药物的毒性。