[发明专利]具有粘度改变表型的丝状真菌

权利要求书

1.一种衍生自亲本株的丝状真菌变异株，所述变异株包含引起所述变异株的细胞与所述亲本株的细胞相比产生改变量的功能性Tps2蛋白的遗传改变，其中所述变异株的细胞在深层培养中的好氧发酵过程中产生这样的细胞肉汤，所述细胞肉汤(i)与所述亲本株的细胞相比，需要改变的搅拌量来维持预选的溶氧量，和/或(ii)与所述亲本株的细胞相比，在预选的搅拌量处维持改变的溶氧量。

2.根据权利要求1所述的变异株，其中所述功能性Tps2蛋白的改变量为减少量，并且所述变异株在深层培养中的好氧发酵过程中产生这样的细胞肉汤，所述细胞肉汤(i)与所述亲本株的细胞相比，需要减少的搅拌来维持预选的溶氧量，和/或(ii)与所述亲本株的细胞相比，在预选的搅拌量处维持增加的溶氧量。

3.根据权利要求1或2所述的变异株，其中所述遗传改变包含所述亲本株中存在的tps2基因的破坏。

4.根据权利要求3所述的变异株，其中所述tps2基因的破坏是所述tps2基因的全部或部分缺失的结果。

5.根据权利要求3所述的变异株，其中所述tps2基因的破坏是包含所述tps2基因的基因组DNA的一部分缺失的结果。

6.根据任何权利要求3所述的变异株，其中所述tps2基因的破坏是所述tps2基因诱变的结果。

7.根据权利要求3-6中任一项所述的变异株，其中所述tps2基因的破坏使用位点特异性重组进行。

8.根据权利要求3至7中任一项所述的变异株，其中所述tps2基因的破坏与在所述tps2基因的基因座处引入选择性标记组合进行。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的变异株，其中所述变异株不产生功能性Tps2蛋白。

10.根据权利要求1-8中任一项所述的变异株，其中所述变异株不产生Tps2蛋白。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的变异株，其中所述变异株还包含编码所关注的蛋白质的基因。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的变异株，其还包含sfb3基因的破坏。

13.根据权利要求1-12中任一项所述的变异株，其还包含至少一个选自以下的基因的破坏：sfb3基因、seb1基因、mpg1基因、gas1基因和crz1基因。

14.根据权利要求1-13中任一项所述的变异株，其中所述变异株每单位量生物质产生与所述亲本株基本上相同量或更多的蛋白质。

15.根据权利要求1-14中任一项所述的变异株，其中所述丝状真菌为盘菌亚门(Pezizomycotina)物种。

16.根据权利要求1-15中任一项所述的变异株，其中所述丝状真菌为木霉属(Trichoderma)物种。

17.根据权利要求1-16中任一项所述的变异株，其中所述丝状真菌为里氏木霉(Trichoderma reesei)。

18.一种产生丝状真菌细胞变异株的方法，其包括：将遗传改变引入丝状真菌细胞的亲本株中，与所述亲本株的细胞相比所述遗传改变改变了功能性Tps2蛋白的产生，从而产生变异丝状真菌细胞，所述变异丝状真菌细胞在深层培养中的好氧发酵过程中产生这样的细胞肉汤，所述细胞肉汤(i)与所述亲本株的细胞相比，需要改变的搅拌量来维持预选的溶氧量，和/或(ii)与所述亲本株的细胞相比，在预选的搅拌量处维持改变的溶氧量。

19.根据权利要求18所述的方法，其中所述遗传改变减少或防止功能性Tps2蛋白的产生，从而产生变异丝状真菌细胞，所述变异丝状真菌细胞在深层培养中的好氧发酵过程中产生这样的细胞肉汤，所述细胞肉汤(i)与所述亲本株的细胞相比，需要减少的搅拌来维持预选的溶氧量，和/或(ii)与所述亲本株的细胞相比，在预选的搅拌量处维持增加的溶氧量。

20.根据权利要求18或19所述的方法，其中所述遗传改变包含使用遗传操作破坏亲本丝状真菌细胞中的所述tps2基因。

21.根据权利要求18-20中任一项所述的方法，其中所述遗传改变包含使用遗传操作缺失亲本丝状真菌细胞中的所述tps2基因。