[发明专利]合成的植酸酶变体有效
申请号: | 201280019478.8 | 申请日: | 2012-04-18 |
公开(公告)号: | CN103687944A | 公开(公告)日: | 2014-03-26 |
发明(设计)人: | S·哈夫纳;A·威尔泽尔;R·图默 | 申请(专利权)人: | 巴斯夫欧洲公司 |
主分类号: | C12N9/16 | 分类号: | C12N9/16;C07K14/00 |
代理公司: | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人: | 黄革生;林柏楠 |
地址: | 德国路*** | 国省代码: | 德国;DE |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 合成 植酸酶 变体 | ||
1.植酸酶,其具有的氨基酸序列与SEQ ID24的氨基酸序列具有至少90%的同一性。
2.根据权利要求1的植酸酶,基于根据SEQ ID24的位置,所述植酸酶具有在选自以下位置的至少一个的氨基酸修饰,所述位置选自位置1、2、3、4、5、6、7、8、9、12、16、33、37、67、71、75、76、77、78、92、109、118、119、120、121、123、136、141、144、152、155、156、159、164、166、193、200、217、258、260、261、268、270、276、300、322、345、346、371、374、398和406。
3.根据权利要求2的植酸酶,其具有5个,优选地6个、7个、8个、9个或10个修饰。
4.根据权利要求1的植酸酶,相对于SEQ ID24的氨基酸序列,所述植酸酶具有选自以下的至少一个修饰,所述修饰选自S1-;D2-,E;T3Q,A4G,E;P5A;A6S,D;G7K;F8Y,M;Q9K;K12R;L16V;N33D,M;H37Y;R67L;Q71E;P75N;K76N,I;D77T;N78T;D92A,E,N,T,V;Q109N,E;Q118S;N119A,T;I120L;Q121T;A123V;S136K;Q141K;A144E;T152G,A;E155N;T156G;Q159N;S164E;A166E,H;Q193L;A200N;S217G;D258N;M260I;S261H;K268N;N270Q;Q276N;I300L;T322Q;D345G;N346G;L371A;H374N;D398E和Q406K。
5.根据权利要求4的植酸酶,其具有5个,优选地6个、7个、8个、9个或10个修饰。
6.根据权利要求1的植酸酶,其具有选自以下的累积修饰的至少一个,所述累积修饰选自:
(PhV-001)D2E A4E A6S F8Y N33M K76N N78T D92N Q121T A123V T152G S164E A200N D258N S261H N270Q H374N D398E
(PhV-002)D2E A4E A6S F8Y N33M K76N N78T D92A Q121T A123V T152G S164E A200N D258N S261H N270Q H374N D398E
(PhV-003)D2E A4E A6S F8Y N33M R67L K76N N78T D92A Q121T A123V T152G S164E A200N D258N M260I S261H N270Q H374N D398E
(PhV-004)D2E A4E A6S F8Y N33M R67L K76N N78T D92N Q109N Q121T A123V A144E T152G Q159N S164E A200N S217G D258N M260I S261H N270Q H374N D398E
(PhV-020)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R N33M K76N N78T D92N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-031)D2E A4E A6S F8Y N33M K76N N78T D92N Q121T S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-048)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R N33M K76I N78T D92N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-053)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R N33M K76N N78T D92N Q121T A123V T152G S164E A200N D258N S261H N270Q I300L H374N
(PhV-055)D2E A4E A6S F8Y N33M K76N N78T D92N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H N270Q Q276N H374N
(PhV-058)D2E A4E A6S F8Y N33M K76N N78T D92N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-059)D2E A4E A6S F8Y N33M K76N N78T D92N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H N270Q H374N D398E
(PhV-060)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R N33M K76N N78T D92N Q109N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H N270Q I300L N346G H374N
(PhV-064)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R K76N N78T D92A Q121T S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-065)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R K76N N78T D92T Q121T S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-066)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R K76N N78T D92V Q121T S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-067)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R K76N N78T D92A Q121T A123V S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-068)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R K76N N78T D92E Q121T A123V S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-069)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R K76N N78T D92T Q121T A123V S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-070)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R K76N N78T D92V Q121T A123V S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-071)ASRNADKMK9 K12R K76N N78T D92N Q121T S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-072)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R K76N N78T D92E Q121T S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-073)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R K76I N78T D92N Q109N Q121T S164E A200N D258N S261H N270Q I300L H374N
(PhV-074)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R K76I N78T D92N Q109N Q121T S164E A200N D258N S261H N270Q I300L H374N D398E
(PhV-075)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R K76N N78T D92N Q109N Q121T A144E S164E A200N S217G D258N S261H N270Q I300L H374N
(PhV-076)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R K76N N78T D92A Q121T A123V S164E A200N D258N S261H N270Q I300L H374N
(PhV-077)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R K76N N78T D92E Q121T A123V S164E A200N D258N S261H N270Q I300L H374N
(PhV-078)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R K76N N78T D92T Q121T A123V S164E A200N D258N S261H N270Q I300L H374N
(PhV-079)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R K76N N78T D92V Q121T A123V S164E A200N D258N S261H N270Q I300L H374N
(PhV-081)D2E A4E A6S F8Y N33M K76N N78T D92N Q121T A123V T152G S164E A200N D258N S261H N270Q H374N D398E
(PhV-083)D2E A4E A6S F8Y N33M K76N N78T D92N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H N270Q Q276N I300L H374N D398E
(PhV-084)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R K76N N78T D92A Q121T S136K S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-085)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R K76I N78T D92A Q109N Q121T S164E A200N D258N S261H N270Q I300L H374N
(PhV-088)D2E A4E A6S F8Y N33M K76N N78T D92N Q121T T152G T156G S164E A200N D258N S261H N270Q H374N D398E
(PhV-089)D2E A4E A6S F8Y N33M K76N N78T D92N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H N270Q I300L H374N D398E
(PhV-094)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R N33M K76N N78T D92N Q109N Q121T A123V T152G T156G S164E A200N D258N S261H N270Q Q276N I300L N346G H374N
(PhV-095)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R N33M K76I N78T D92N Q121T A144E T152G S164E A200N S217G D258N S261H N270Q H374N D398E
(PhV-096)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R K76I N78T D92A Q121T A123V S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-097)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R K76N N78T D92A Q109N Q121T A123V Q159N S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-098)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R K76N N78T D92A Q121T S136K S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-099)D2E A4E A6S F8Y N33D K76N N78T D92N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-101)N33D K76N N78T D92N Q121T T152G S164E A200N H374N
(PhV-103)N33D D92N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-104)N33M K76N N78T D92N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-105)N33D D92N S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-106)N33D K76N N78T D92N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H H374N
(PhV-107)N33D K76N N78T D92N Q121T S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-108)N33D D92N Q121T A123V A144E T152G S164E A200N S217G D258N S261H N270Q H374N
(PhV-109)N33D D92N Q121T A123V A144E T152G Q159N S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-110)N33D D92N Q121T T152G Q159N S164E A200N S217G D258N M260I S261H N270Q H374N
(PhV-111)N33D D92A Q121T T152G Q159N S164E A200N S217G D258N M260I S261H N270Q H374N
(PhV-112)S1-D2-T3Q A4G P5A N33D D92N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-113)S1-D2-T3Q A4G P5A N33D D92N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-114)A6D G7K F8M Q9K N33D D92N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-115)N33D D92A Q121T A123V A144E T152G Q159N S164E A200N S217G D258N M260I S261H N270Q H374N
(PhV-116)N33D D92N Q121T A123V A144E T152G Q159N S164E A200N S217G D258N M260I S261H N270Q H374N
(PhV-117)S1A D2S T3R A4N N33D D92N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-118)N33D D92N Q121T A123V A144E T152G S164E A200N S217G D258N M260I S261H N270Q H374N
(PhV-119)N33D D92N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-120)D2E A4E A6S F8Y N33M K76N N78T D92N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-121)S1-D2-T3Q A4G P5A A6D G7K F8M Q9K K12R N33M K76N N78T D92N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-122)N33M K76N N78T D92N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-123)D2E A4E A6S F8Y N33D D92N S164E A200N H374N
(PhV-124)D2E A4E A6S F8Y N33D K76N N78T D92N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H H374N
(PhV-125)N33D D92A Q121T A123V T152G S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-126)N33D D92A Q121T A123V T152G S164E A200N D258N M260I S261H N270Q H374N
(PhV-127)N33D D92N Q121T A144E T152G Q159N S164E A200N S217G D258N M260I S261H N270Q H374N
(PhV-128)A4E A6S N33D D92N Q121T T152G S164E A200N D258N S261H N270Q H374N
(PhV-129)N33D R67L D92N Q121T A144E T152G Q159N S164E A200N S217G D258N M260I S261H N270Q H374N
(PhV-130)L16V N33D D92N Q121T A144E T152G Q159N S164E A200N S217G D258N M260I S261H N270Q H374N
(PhV-131)K12R N33D D92N Q121T A144E T152G Q159N S164E A200N S217G D258N M260I S261H N270Q H374N
(PhV-132)K12R L16V N33D D92N Q121T T152G Q159N S164E A200N S217G D258N M260I S261H N270Q H374N
(PhV-133)N33D R67L D92N Q121T A123V T152G Q159N S164E A200N S217G D258N M260I S261H N270Q H374N
(PhV-134)N33D D92N Q121T A144E T152G Q159N S164E A166E A200N S217G D258N M260I S261H N270Q H374N
(PhV-135)N33D R67L D92N Q121T A123V A144E T152G Q159N S164E A166E A200N S217G D258N M260I S261H N270Q H374N
(PhV-136)N33D D92A Q121T A123V A144E T152G Q159N S164E A166E A200N S217G D258N M260I S261H N270Q H374N
(PhV-137)N33D D92A Q121T T152G Q159N S164E A166E A200N S217G D258N M260I S261H N270Q H374N D398E
(PhV-138)N33D D92N Q121T A123V A144E T152G Q159N S164E A166E A200N S217G D258N M260I S261H N270Q H374N D398E
(PhV-139)N33D D92N Q121T A144E T152G Q159N S164E A200N S217G D258N S261H N270Q H374N
(PhV-140)K12R N33D R67L D92N Q121T A123V A144E T152G S164E A200N S217G D258N S261H N270Q H374N
(PhV-141)L16V N33D R67L D92N Q121T A123V A144E T152G S164E A200N S217G D258N S261H N270Q H374N
(PhV-142)N33D R67L D92N Q121T A123V A144E T152G S164E A166E A200N S217G D258N S261H N270Q H374N
(PhV-143)N33D D92N Q121T A123V A144E T152G S164E A166E A200N S217G D258N S261H N270Q I300L H374N
(PhV-144)N33D D92N I120L Q121T A123V A144E T152G S164E A200N S217G D258N S261H N270Q I300L H374N
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(PhV-146)N33D R67L D92N I120L Q121T A123V A144E T152G S164E A166E A200N S217G D258N S261H N270Q L371A H374N or
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