[发明专利]用于动物细胞的表达载体

权利要求书

1.一种用于动物细胞的表达载体，其包括位于启动子的5'端和/或转录终止位点的3'端的至少一个拷贝的MAR元件和SAR元件，所有所述元件在表达载体内均有效地相互连接。

2.如权利要求1所述的用于动物细胞的表达载体，MAR元件和SAR元件彼此相邻或者被编码或非编码序列彼此分隔。

3.如权利要求1所述的用于动物细胞的表达载体，所述载体包括正向或反向的MAR元件或SAR元件。

4.如权利要求1所述的用于动物细胞的表达载体，所述MAR元件是β球蛋白MAR元件。

5.如权利要求4所述的用于动物细胞的表达载体，所述β球蛋白MAR元件具有Genbank登录号为L22754的序列。

6.如权利要求1所述的用于动物细胞的表达载体，所述SAR元件是CSP-B SAR元件或者干扰素βSAR元件。

7.如权利要求6所述的用于动物细胞的表达载体，所述CSP-B SAR元件具有Genbank登录号为M62716的序列。

8.如权利要求6所述的用于动物细胞的表达载体，所述干扰素βSAR元件具有Genbank登录号为M83187的序列。

9.如权利要求1所述的用于动物细胞的表达载体，所述启动子是SV40启动子、源自CMV的启动子或者EF1α启动子。

10.如权利要求1所述的用于动物细胞的表达载体，所述启动子是小鼠EF1α启动子突变体。

11.如权利要求10所述的用于动物细胞的表达载体，所述启动子突变体具有SEQ ID NO.34所示的序列。

12.如权利要求1所述的用于动物细胞的表达载体，多腺苷酸化信号连接于转录终止位点的5’端。

13.如权利要求1所述的用于动物细胞的表达载体，表达受启动子调节的靶基因整合到表达载体中。

14.一种用于动物细胞的表达载体，其包括位于启动子的5'端和/或转录终止位点的3'端的至少一个拷贝的β球蛋白MAR元件、CSP-B SAR元件，其作为用于动物细胞的表达载体，包括有效地连接其上的启动子以及转录终止位点，其中，所述启动子是小鼠EF1α启动子突变体。

15.如权利要求14所述的用于动物细胞的表达载体，所述载体是具有SEQ ID NO.35的序列的pC(F)mEGM(R)。

16.如权利要求14所述的用于动物细胞的表达载体，表达受启动子调节的靶基因整合到表达载体中。

17.一种用权利要求1到16任一项所述的用于动物细胞的表达载体转化的重组微生物。

18.一种用权利要求13到16任一项所述的用于动物细胞的表达载体转染的重组动物细胞。

19.如权利要求18所述的重组动物细胞，所述动物细胞选自包括CHO细胞、Hela细胞、BHK细胞、NIH/3T3细胞、COS-1细胞、COS-7细胞、CHO-K1细胞和HEK293细胞的组。

20.如权利要求19所述的重组动物细胞，所述动物细胞是CHO细胞。

21.一种靶蛋白的制备方法，所述方法包括：培养如权利要求18所述的转染了用于动物细胞的表达载体的重组动物细胞以表达靶蛋白；并回收所述靶蛋白。

22.一种具有SEQ ID NO.34的序列的小鼠EF1α启动子突变体。