[发明专利]成纤维细胞生长因子的热稳定变体有效
| 申请号： | 201280021174.5 | 申请日： | 2012-03-01 |
| 公开（公告）号： | CN103597076A | 公开（公告）日： | 2014-02-19 |
| 发明（设计）人： | S.S.雍 | 申请（专利权）人： | 人体酶公司 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12N5/0735;C12N5/02 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 卢碧祺 |
| 地址： | 美国伊*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 纤维 细胞 生长因子 稳定 变体 | ||
1.一种编码选自下述的多肽的分离的多核苷酸：
（i）SEQ ID NO:2的变体或其片段，其包含选自Q65L、Q65I、Q65V、N111A、N111G、C96S和C96T的至少一个氨基酸置换；
（ii）与SEQ ID NO:2具有至少85%序列同一性的多肽或其片段，其包含选自Q65L、Q65I、Q65V、N111A、N111G、C96S和C96T的至少一个氨基酸置换。
2.权利要求1的分离的多核苷酸，其中该编码的多肽包含氨基酸置换Q65I、N111G和C96S。
3.权利要求1的分离的多核苷酸，其中该编码的多肽包含SEQ ID NO:8。
4.一种表达载体，其包含权利要求1的多核苷酸。
5.一种表达载体，其包含权利要求2的多核苷酸。
6.一种选自下述的分离的多肽：
（i）SEQ ID NO:2的变体或其片段，其包含选自Q65L、Q65I、Q65V、N111A、N111G、C96S和C96T的至少一个氨基酸置换；
（ii）与SEQ ID NO:2具有至少85%序列同一性的多肽或其片段，其包含选自Q65L、Q65I、Q65V、N111A、N111G、C96S和C96T的至少一个氨基酸置换。
7.权利要求6的分离的多肽，其中该多肽包含氨基酸置换Q65I、N111G和C96S。
8.权利要求6的分离的多肽，其中该多肽包含SEQ ID NO：8。
9.一种用于培养胚胎干细胞的方法，其包括在包含有效量的权利要求6的多肽的不依赖于饲养细胞的培养基中培养该胚胎干细胞，其中该有效量包含使该细胞维持具有未分化形态至少5传代所需的量。
10.权利要求9的方法，其中该不依赖于饲养细胞的培养基是hESF9、mTeSR1或STEMPRO?。
11.权利要求9的方法，其中该有效量的多肽是约1.0 ng/μl - 约100 ng/μl培养基。
12.权利要求9的方法，其中该胚胎干细胞是人ES细胞、小鼠ES细胞、牛ES细胞或猫ES细胞。
13.一种用于维持人胚胎干细胞处于未分化状态的方法，其包括使人胚胎干细胞与有效量的包含SEQ ID NO:8的多肽或SEQ ID NO:4的变体接触，该多肽或变体包含氨基酸置换Q56I、N92G和C87S。
14.权利要求13的方法，其中该有效量的多肽是约1.0 ng/μl - 约100 ng/μl培养基。
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