[发明专利]热稳定性碳酸酐酶及其使用方法

权利要求书

1.一种由SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列以及任选的信号肽组成的重组多肽。

2.权利要求1的重组多肽，其中编码所述氨基酸序列的多核苷酸为SEQ ID NO:1。

3.权利要求1或2的重组多肽，其中当在8至10.5的pH下温育30分钟或更长时间时所述多肽保持大于25％的碳酸酐酶活性。

4.根据权利要求1或2所述的重组多肽，其中当在8.5至10.5的pH下温育5个或更多个小时时所述多肽保持大于70％的碳酸酐酶活性。

5.根据权利要求3所述的重组多肽，其中当在8.5至10.5的pH下温育5个或更多个小时时所述多肽保持大于70％的碳酸酐酶活性。

6.根据权利要求1或2所述的重组多肽，其中当在25℃的温度下温育24小时时所述多肽保持至少90％的碳酸酐酶活性。

7.根据权利要求1或2所述的重组多肽，其中当在40℃的温度下温育24小时时所述多肽保持至少90％的碳酸酐酶活性。

8.根据权利要求1或2所述的重组多肽，其中当在50℃的温度下温育3小时时所述多肽保持至少50％的碳酸酐酶活性。

9.根据权利要求1或2所述的重组多肽，其中当在50℃的温度下温育3小时时所述多肽保持至少25％的碳酸酐酶活性。

10.根据权利要求1或2所述的重组多肽，其中当在高离子强度条件下在20℃至50℃的温度下温育1至3小时时所述多肽保持至少50％的碳酸酐酶活性。

11.根据权利要求10所述的重组多肽，其中所述高离子强度条件包括1M碳酸氢盐。

12.根据权利要求1或2中任一项所述的重组多肽，其中所述多肽在1M至2M碳酸氢盐存在下具有升高的解链温度。

13.根据权利要求3所述的重组多肽，其中所述多肽在较高离子强度下具有较高的热稳定性和/或解链温度。

14.一种组合物，其包含根据权利要求1-13中任一项所述的重组多肽以及含二氧化碳的介质。

15.根据权利要求14所述的组合物，其中所述重组多肽被固定化。

16.根据权利要求15所述的组合物，其中所述重组多肽被固定在聚合物、膜、基质、胶束材料、圆片、固体支撑物或微粒上。

17.一种分离的核酸，编码根据权利要求1-13中任一项所述的重组多肽。

18.权利要求17的分离的核酸，其具有SEQ ID NO:1的序列。

19.根据权利要求17所述的分离的核酸，其中所述多肽还包含信号肽序列。

20.根据权利要求19所述的分离的核酸，其中所述信号肽序列选自SEQ ID NO:10-15、69-73、81-83以及131-132。

21.一种表达载体，包含与调节序列有效组合的根据权利要求18-20中任一项所述的分离的核酸。

22.一种宿主细胞，包含根据权利要求21所述的表达载体。

23.根据权利要求22所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞是细菌细胞或真菌细胞。

24.一种组合物，包含根据权利要求22或23所述的宿主细胞以及培养基。

25.一种产生碳酸酐酶的方法，包括：在合适条件下在培养基中培养根据权利要求22或23所述的宿主细胞以产生所述碳酸酐酶。

26.一种组合物，包含依据权利要求25所述的方法在所述培养基的上清液中产生的所述碳酸酐酶。

27.一种从含二氧化碳的介质提取二氧化碳的方法，包括：使所述含二氧化碳的介质与根据权利要求1-13中任一项所述的多肽接触以得到二氧化碳减少的介质。

28.根据权利要求27所述的方法，其中所述含二氧化碳的介质选自气体、液体和多相混合物。

29.根据权利要求27所述的方法，其中所述含二氧化碳的介质是选自烟道气、原天然气、合成气、氢气和沼气的气体。