[发明专利]用于蛋白质分泌和木质纤维素降解的突变细胞

权利要求书

1.一种增加来自细胞的蛋白质的分泌的方法，所述方法包括：

（a）提供突变细胞，其中所述突变细胞包括两种或更多种β-葡萄糖苷酶基因中的失活性突变；以及

（b）将所述突变细胞与纤维素类生物质接触，其中所述纤维素类生物质诱导所述突变细胞分泌所述蛋白质。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其中所述突变细胞进一步包括位于该细胞的cre-1基因中的失活性突变。

3.一种增加来自细胞的蛋白质的分泌的方法，所述方法包括：

（a）提供突变细胞，其中所述突变细胞包括位于该细胞的cre-1基因中的失活性突变；以及

（b）将所述突变细胞与纤维素类生物质接触，其中所述纤维素类生物质诱导所述突变细胞分泌所述蛋白质。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述突变细胞进一步包括位于两种或更多种β-葡萄糖苷酶基因中的失活性突变。

5.根据权利要求1-4中任意一项所述的方法，其特征在于，所述纤维素类生物质包括多糖，低聚糖，纤维素，微晶纤维素，纤维糊精，纤维二糖，纤维三糖，纤维四糖，纤维五糖，和纤维六糖中的一种或多种。

6.根据权利要求1-4中任意一项所述的方法，其特征在于，所述纤维素类生物质包括纤维二糖。

7.一种增加来自细胞的蛋白质的分泌的方法，所述方法包括：

（a）提供突变细胞，其中所述突变细胞包括两种或更多种β-葡萄糖苷酶基因中的失活性突变；以及

（b）将所述突变细胞与糖类接触，其中所述糖类诱导所述突变细胞分泌所述蛋白质。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述突变细胞进一步包括位于所述细胞的cre-1基因中的失活性突变。

9.一种增加来自细胞的蛋白质的分泌的方法，所述方法包括：

（a）提供突变细胞，其中所述突变细胞包括位于该细胞的cre-1基因中的失活性突变；以及（b）将所述突变细胞与糖类接触，其中所述糖类诱导所述突变细胞分泌所述蛋白质。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述突变细胞进一步包括位于两种或更多种β-葡萄糖苷酶基因中的失活性突变。

11.根据权利要求7-10中任意一项所述的方法，其特征在于，所述糖类选自多糖，低聚糖，纤维素，微晶纤维素，纤维糊精，纤维二糖，纤维三糖，纤维四糖，纤维五糖，和纤维六糖。

12.根据权利要求7-10中任意一项所述的方法，其特征在于，所述糖类为纤维二糖。

13.根据权利要求1-12中任意一项所述的方法，其特征在于，所述分泌蛋白为纤维素诱导蛋白。

14.根据权利要求1-13中任意一项所述的方法，其特征在于，所述分泌蛋白选自：纤维素酶、GH61酶、纤维二糖脱氢酶、内酯酶、碳水化合物酯酶、多糖裂解酶，含有纤维素结合结构域的蛋白质，及其组合。

15.根据权利要求1-13中任意一项所述的方法，其特征在于，所述分泌蛋白为纤维素酶。

16.根据权利要求1-13中任意一项所述的方法，其特征在于，所述分泌蛋白由选自以下的基因编码：NCU07340、NCU09680、NCU07898、NCU00762、NCU08760、NCU05057、NCU02240、NCU07190、NCU07898、NCU08760、NCU00206、NCU07143、NCU09491、NCU09664、NCU05598、NCU09764，和NCU05137。

17.根据权利要求1-16中任意一项所述的方法，其特征在于，所述突变细胞进一步包括位于该细胞的至少一种β-甘露糖苷酶基因中的失活性突变。

18.根据权利要求1-17中任意一项所述的方法，其特征在于，所述突变细胞进一步包括位于该细胞的至少一种磷脂酶基因或磷脂酶类基因中的失活性突变。

19.根据权利要求1-18中任意一项所述的方法，其特征在于，所述失活性突变为缺失。

20.根据权利要求1-19中任意一项所述的方法，其特征在于，所述细胞为重组细胞。