[发明专利]白细胞分析系统和方法

说明书

相关申请的交叉引用

本申请根据美国法典35篇119条(e)款要求题为分析白细胞的方法(Method For Analyzing White Blood Cells)并在2011年5月4日提交的美国临时专利申请号61/482,541的权益，所述临时专利申请的全部公开内容以引用的方式并入本文。

本申请还涉及2012年4月26日提交的、代理人案卷号为ADDV-017(11041USO1)，题为“有核红细胞分析系统和方法(NUCLEATED RED BLOOD CELL ANALYSIS SYSTEM AND METHOD)”的申请号xx/xxx,xxx；和2012年4月26日提交的、代理人案卷号为ADDV-018(11042USO1)，题为“嗜碱性粒细胞分析系统和方法(BASOPHIL ANALYSIS SYSTEM AND METHOD)”的申请号xx/xxx,xxx，这些申请的全部公开内容以引用的方式整体并入本文。

技术领域

本发明涉及血液学系统和方法。更具体来说，本发明涉及用于分析血液样本以鉴定、分类和/或定量血液样本中的白细胞(WBC)和WBC子群体的系统和方法。

背景技术

开发用于分析WBC(包括计数和分类)的准确且高效的血液学测定已成为一个挑战。开发准确且高效的测定具有困难的一个原因在于WBC在样本中的总血细胞中的浓度相对较低(约0.1%至0.2%)。努力使用于分析WBC以及配制强健WBC试剂的先进方法工程化仍然是自动血液学分析仪领域中的一个最优先考虑事项。

通常，溶解红细胞(RBC)是在计数和分类WBC和WBC子群体之前消除来自RBC的干扰且浓缩WBC所需的。更具体来说，准确且高效的WBC分析要求：(1)在小于30秒内完全溶解RBC；(2)在溶解之后使RBC的大片段断裂成小片；以及(3)保存WBC用于准确计数和恰当分类。如果血液样本“溶解不足”，那么未溶解RBC即使在极小浓度下也会干扰WBC计数和差异分析。类似地，溶解RBC的较大片段可干扰WBC计数和差异分析。实际上，难以使未溶解RBC和/或溶解RBC的较大片段与淋巴细胞(最小的WBC)分离。如果血液样本“溶解过度”，那么由于对WBC的细胞膜的过度损伤对WBC的分类可能会受不利影响。

在一些情况下，WBC分析的困难性可能因为存在两种特殊类型的样本：即含有溶解抗性红细胞(rstRBC)的样本和含有易碎淋巴细胞的样本而加剧。在样本含有rstRBC的情况下，WBC计数和淋巴细胞百分比由于除真实淋巴细胞以外的粒子的影响而被错误地报道为“较高”，从而对患者造成不当诊断和治疗的风险。在样本含有易碎淋巴细胞的情况下，损伤淋巴细胞在WBC差异分析中可能不显示其特征。此外，暴露的WBC核可被计数为有核红细胞(nRBC)，从而在某些测定中产生假阳性nRBC计数。

发明内容

本文提供用于分析血液样本、且更具体来说用于进行白细胞(WBC)差异分析的系统和方法。一般说来，所公开的系统和方法借助于荧光染色和荧光触发策略筛查WBC。因此，来自未溶解RBC(例如rstRBC)和RBC片段的干扰被大致上或完全消除，由此确保对WBC和WBC子群体的准确计数和区别。所述系统和方法还使得能够开发适用于测定含有易碎淋巴细胞(或其它易碎WBC)的样本(包括老化样本)的相对温和的WBC试剂。

在一个实施方案中，举例而言，本文公开的系统和方法包括：(a)用就发射光谱而言对应于血液学仪器的激发源的专有细胞膜可透性荧光染料染色血液样本；(b)使用荧光触发器筛查所述血液样本的WBC；以及(c)使用(1)轴向光损失、(2)中等角度散射、(3)90°偏振侧向散射、(4)90°去偏振侧向散射以及(5)荧光发射的测量结果的组合来进行差异分析。

附图说明

并入本文的附图构成说明书的一部分。附图连同本书面描述一起进一步用于说明提供的系统和方法的原理，并且使得相关领域技术人员能够制造和使用提供的系统和方法。在附图中，相同参考数字指示相同或功能上类似的元件。

图1A-1E显示全血样本的频率曲线，其显示在溶解之后的WBC和RBC残余物。

图1A是显示轴向光损失信号的测量结果的频率曲线。

图1B是显示中等角度散射的测量结果的频率曲线。

图1C是显示90°偏振侧向散射的测量结果的频率曲线。

图1D是显示90°去偏振侧向散射的测量结果的频率曲线。

图1E是显示荧光的测量结果的频率曲线。