[发明专利]在袋中的微载体上培养细胞的方法

权利要求书

1.一种在袋中培养细胞的方法，包括以下步骤：

a)提供无菌柔性袋(1；21；41)，其包括附连到所述培养袋的壁(3、7；23、27；43、47)上的过滤材料(2；22；42)，其中，所述过滤材料在所述袋的内部界定腔室(6；26；46)，所述腔室流体地连接到所述袋的壁(3、7；23、27；43、47)中的第一端口(4；24；44)，

b)对所述袋提供搅动机构，

c)将细胞培养介质、微载体和细胞引入到所述袋，

d)用所述搅动机构提供的搅动来在所述袋中培养细胞，从而允许形成具有固定不动的细胞的微载体悬浮液，以及通过所述袋的壁中的第二端口来供应至少一种气体，

e)通过所述过滤材料(2；22；42)和所述第一端口(4；24；44)，从所述微载体悬浮液中与液体一起移除细胞碎片和/或游离细胞。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述搅动机构包括可动支承件(5；25；45)，并且所述步骤b)包括将所述袋安装在所述可动支承件上。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述可动支承件通过摇动、回转、振荡和/或轨道运动来提供搅动。

4.根据权利要求1至3中的任一项所述的方法，其特征在于，调节搅动的强度，以阻止在所述过滤材料(2；22；42)上形成滤饼。

5.根据权利要求1至4中的任一项所述的方法，其特征在于，所述过滤材料(2；22；42)具有介于大约30微米和大约200微米之间的孔径额定值，诸如为90至150微米。

6.根据权利要求1至5中的任一项所述的方法，其特征在于，所述过滤材料(2；22；42)包括筛网过滤器。

7.根据权利要求1至6中的任一项所述的方法，其特征在于，所述过滤材料(2；22；42)是细胞排斥性的，诸如疏水性的。

8.根据权利要求1至7中的任一项所述的方法，其特征在于，所述细胞包括动物细胞，诸如哺乳动物细胞，例如Vero、HEK、MDCK细胞、干细胞或祖细胞。

9.根据权利要求1至8中的任一项所述的方法，其特征在于，进一步包括使所述细胞感染病毒的步骤。

10.根据权利要求1至9中的任一项所述的方法，其特征在于，在步骤d)和e)之间进一步包括从所述微载体释放所述细胞的步骤。

11.根据权利要求1至10中的任一项所述的方法，其特征在于，所述微载体具有1.02–1.05 g/ml的密度和100至400微米的平均粒度。

12.根据权利要求1至11中的任一项所述的方法，其特征在于，所述微载体包括平均粒度为125至280微米的纤维素或交联葡聚糖水凝胶珠。

13.一种由柔性材料制成的细胞培养袋(1；21；41)，包括微载体和细胞，并且进一步包括附连到所述培养袋的壁(3、7；23、27；43、47)上的过滤材料(2；22；42)，其中，所述过滤材料在所述袋的内部界定腔室(6；26；46)，所述腔室流体地连接到所述袋的壁(3、7；23、27；43、47)中的端口(4；24；44)。

14.根据权利要求13所述的细胞培养袋(1；21；41)，其特征在于，所述过滤材料(2；22；42)具有介于大约30微米和大约200微米之间的孔径额定值，诸如为90至150微米。

15.根据权利要求13或14所述的细胞培养袋(1；21；41)，其特征在于，所述过滤材料(2；22；42)是细胞排斥性的，诸如为疏水性的。

16.根据权利要求13至15中的任一项所述的细胞培养袋(1；21；41)，其特征在于，所述过滤材料(2；22；42)包括筛网过滤器。

17.根据权利要求16所述的细胞培养袋(1；21；41)，其特征在于，所述筛网过滤器包括伸长开口，其具有诸如为至少大约2的长度-宽度比。

18.根据权利要求13至17中的任一项所述的细胞培养袋，其特征在于，所述过滤材料为波纹状。

19.根据权利要求13至18中的任一项所述的细胞培养袋(1；41)，其特征在于，所述腔室(6；46)由所述过滤材料和所述袋的底壁(3；43)界定。