[发明专利]治疗性融合蛋白

权利要求书

1.单链多肽融合蛋白，其包含：

(a)无细胞毒性蛋白酶，其能够切割靶细胞的胞吐融合器的蛋白；

(b)靶向部分，其能够结合靶细胞上的结合位点，所述结合位点能够进行胞吞作用从而被引入到所述靶细胞内的内体中；

(c)易位结构域，其能够将所述蛋白酶从内体中易位穿过内体膜并且进入所述靶细胞的细胞质中；

(d)第一蛋白酶切割位点，在所述位点所述融合蛋白能够被第一蛋白酶切割，其中所述第一蛋白酶切割位点位于所述无细胞毒性蛋白酶与所述易位结构域之间；

(e)第二蛋白酶切割位点，在所述位点所述融合蛋白能够被第二蛋白酶切割，其中所述第二蛋白酶切割位点位于所述易位结构域与所述靶向部分之间；和

(f)在所述靶向部分与所述易位结构域之间的共价键，其中在第二蛋白酶切割位点的蛋白水解切割之后，所述靶向部分通过所述共价键保持连接至所述易位结构域。

2.权利要求1的融合蛋白，其中所述易位结构域位于所述无细胞毒性蛋白酶与所述靶向部分之间。

3.权利要求1的融合蛋白，其中所述靶向部分位于所述无细胞毒性蛋白酶与所述易位结构域之间；并且其中所述第一蛋白酶切割位点进一步位于所述无细胞毒性蛋白酶与所述靶向部分之间。

4.前述权利要求任一项的融合蛋白，其中所述无细胞毒性蛋白酶位于所述蛋白的N端。

5.前述权利要求任一项的融合蛋白，其中所述共价键是二硫键。

6.前述权利要求任一项的融合蛋白，其中存在位于所述易位结构域与所述靶向部分之间的提供二级多肽结构的短多肽，并且其中所述二级多肽结构起作用使得所述靶向部分的一部分与所述易位结构域紧密接近，由此使能量上更有利的共价键形成。

7.前述权利要求任一项的融合蛋白，其中所述靶向部分包含第一和第二结构域，并且其中所述第一和第二结构域由至多10个氨基酸残基隔开，优选由至多5个氨基酸残基隔开、更优选由0个氨基酸残基隔开。

8.权利要求7的融合蛋白，其中所述靶向部分的第一和第二结构域来源于针对不同受体的配体。

9.前述权利要求任一项的融合蛋白，其中所述靶向部分能够通过所述靶向部分的N端结构域与所述结合位点的结构域之间的相互作用同时通过所述靶向部分的C端结构域与所述结合位点的结构域之间的相互作用与靶细胞上的结合位点相互作用。

10.前述权利要求任一项的融合蛋白，其中所述靶向部分包含肽或由肽组成，所述肽选自由下列组成的组：促性腺素释放素(GnRH)肽，阿片样肽，β-内啡肽，缓激肽，BAM肽，伤害感受肽，强啡肽，甘丙肽，脑啡肽，P物质肽，促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)肽，胃泌素释放肽(GRP)，神经调节肽B肽，铃蟾肽，胃泌素肽，CCK肽，促生长素抑制素(SST)肽，皮质抑素(CST)肽，生长激素释放激素(GHRH)肽，PAR肽，甲状旁腺素(PTH)肽，血管活性肠肽(VIP)，β₂肾上腺素受体激动性肽，胃泌素释放肽，降钙素基因相关肽，促甲状腺素(TSH)肽，胰岛素肽，胰岛素样生长因子肽，戈那瑞林肽，促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)肽，促肾上腺皮质素(ACTH)肽，垂体腺苷环化酶激活肽(PACAP)。

11.前述权利要求任一项的融合蛋白，其中所述无细胞毒性蛋白酶与所述第一蛋白酶切割位点由至多10个氨基酸残基隔开，优选由至多5个氨基酸残基隔开、更优选由0个氨基酸残基隔开。

12.前述权利要求任一项的融合蛋白，其中所述易位结构域与所述第一蛋白酶切割位点由至多10个氨基酸残基隔开，优选由至多5个氨基酸残基隔开、更优选由0个氨基酸残基隔开。

13.前述权利要求任一项的融合蛋白，其中所述易位结构域与所述第二蛋白酶切割位点由至多10个氨基酸残基隔开，优选由至多5个氨基酸残基隔开、更优选由0个氨基酸残基隔开。

14.前述权利要求任一项的融合蛋白，其中所述靶向部分与所述第二蛋白酶切割位点由至多10个氨基酸残基隔开，优选由至多5个氨基酸残基隔开、更优选由0个氨基酸残基隔开。

15.前述权利要求任一项的融合蛋白，其中所述第一蛋白酶与所述第二蛋白酶相同。