[发明专利]适合于在植物中成像和投递应用的量子点载体肽缀合物在审
申请号: | 201280024901.3 | 申请日: | 2012-03-22 |
公开(公告)号: | CN103562397A | 公开(公告)日: | 2014-02-05 |
发明(设计)人: | J.P.萨缪尔;N.C.萨姆伯朱;K.Y.姚;林高峰;S.R.韦布;F.G.伯劳格斯 | 申请(专利权)人: | 陶氏益农公司 |
主分类号: | C12N15/87 | 分类号: | C12N15/87;C12N5/10;C12N5/04;A01H5/00 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 张文辉 |
地址: | 美国印*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 适合于 植物 成像 投递 应用 量子 载体 肽缀合物 | ||
1.一种将感兴趣的分子导入具有细胞壁的植物细胞中以实现植物和种子的稳定转化的方法,该方法包括:
提供所述具有细胞壁的植物细胞;
使量子点(QD)与一种或多种细胞穿透肽(CPP)相互作用以形成QD-肽缀合物;
将一种或多种感兴趣的分子附接于所述一种或多种CPP以形成活化的QD-肽缀合物;
将所述具有细胞壁的细胞和所述活化的QD-肽缀合物置于彼此接触中;并
容许将所述QD-肽缀合物和所述感兴趣的分子摄取到所述具有细胞壁的细胞中。
2.依照权利要求1的方法,其中使QD与一种或多种CPP接触包括将所述一种或多种CPP装配到所述QD的表面上。
3.依照权利要求1的方法,其中将一种或多种感兴趣的分子附接于所述一种或多种CPP包括所述感兴趣分子的带负电荷的基团与所述CPP的末端的带电荷的氨基基团相互作用。
4.依照权利要求1的方法,其进一步包括容许将所述QD-肽缀合物摄取到所述包含细胞壁的植物细胞的区室中。
5.依照权利要求4的方法,其中所述区室选自下组:胞质溶胶、细胞核、液泡形成体、质体、黄化质体、色质体、白色体、油质体、蛋白质体、造粉体、叶绿体、和双层膜的腔。
6.依照权利要求1的方法,其中所述包含细胞壁的植物细胞选自下组:烟草、胡萝卜、玉米、芸苔(canola)、油菜籽(rapeseed)、棉花、棕榈、花生、大豆、稻属物种(Oryza sp.)、拟南芥属物种(Arabidopsis sp.)、蓖麻属物种(Ricinus sp.)、和甘蔗细胞。
7.依照权利要求1的方法,其中所述植物细胞来自选自下组的组织:胚、分生组织、愈伤组织、花粉、叶、花药、根、根尖、花、种子、荚果和茎。
8.依照权利要求1的方法,其中所述一种或多种CPP由选自R9、MPG、TAT、γ-玉米醇溶蛋白和MPG肽的组组成。
9.依照权利要求1的方法,其中所述感兴趣的分子包括选自下组的组分:核酸、DNA、RNA、RNAi分子、基因、质粒、粘粒、YAC、BAC、多肽、酶、激素、糖肽、糖、脂肪、信号传导肽、抗体、维生素、信使、第二信使、氨基酸、cAMP、药物、除草剂、杀真菌剂、抗生素、及其组合。
10.依照权利要求9的方法,其中所述感兴趣的分子包括基因。
11.依照权利要求10的方法,其中所述基因是外来蛋白质基因、农学基因、或标志物基因。
12.依照权利要求9的方法,其进一步包括选择已稳定整合所述感兴趣分子的细胞。
13.依照权利要求12的方法,其中所述选定的细胞是可再生细胞。
14.依照权利要求13的方法,其进一步包括自所述可再生细胞再生植物。
15.一种稳定表达基因的方法,该方法包括:
提供具有细胞壁的植物细胞;
使量子点(QD)与一种或多种细胞穿透肽(CPP)相互作用以形成QD-肽缀合物;
将一种或多种基因附接于所述一种或多种CPP以形成活化的QD-肽缀合物;
将所述具有细胞壁的细胞和所述活化的QD-肽缀合物置于彼此接触中;并
容许将所述QD-肽缀合物和所述一种或多种基因摄取到所述具有细胞壁的细胞中;并
在具有所述植物细胞的植物的后代中表达所述基因。
16.依照权利要求15的方法,其中在叶绿体中表达所述基因。
17.依照权利要求15的方法,其进一步包括选择稳定表达所述基因的细胞。
18.一种用于将分子物质转移入植物细胞中的方法,其包括:
使量子点(QD)与一种或多种细胞穿透肽(CPP)相互作用以形成QD-肽缀合物;
使所述QD-肽缀合物与质粒DNA相互作用以形成活化的QD-肽缀合物结构;并
使所述活化的QD-肽缀合物结构与携带完整壁的植物细胞在允许所述一种或多种CPP和来自所述质粒DNA的所述一种或多种基因摄取入所述植物细胞中的条件下接触。
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