[发明专利]叶绿体转运肽及其使用方法

说明书

对通过EFS-WEB作为文本文件提交的序列列表的引用

通过EFS-Web以电子方式将序列列表的正式文本作为ASCII格式的序列列表提交，该文件名称为414530SEQLIST.txt，创建日期为2012年3月26日，文件大小为34KB，并且该文件与本说明书同时提交。该ASCII格式文档中所含的序列列表是本说明书的一部分，并且全文以引用的方式并入本文。

技术领域

本发明属于分子生物学领域。更具体地讲，本发明涉及通过采用新型叶绿体转运肽使目标序列靶向叶绿体。

背景技术

质体是广泛存在于植物和藻类细胞中的不同细胞器的家族。其中最突出的是叶绿体，其执行诸如光合作用和脂肪酸及氨基酸生物合成之类的基本过程。叶绿体是由如下六种不同亚细胞器区室构成的复合细胞器：三种不同膜(两种包覆膜和内部类囊体膜)和三种区室(包覆膜的内膜空间、基质和内囊体腔)。超过98％的所有质体蛋白在胞浆核糖体上翻译。此类蛋白在翻译后被靶向并输入到细胞器中。如需查看，请参阅Jarvis et al.(2008)New Phytologist179：257-285(Jarvis等人，2008年，《新植物学家》，第179卷，第257-285页)。此类易位由外和内包覆膜中称为TOC(叶绿体外包覆膜处的易位子)和TIC(叶绿体内包覆膜处的易位子)的多蛋白复合物协调。参见Soil et al.(2004)Nature Reviews.Molecular Cell Biology5：198-208(Soll等人，2004年，《分子和细胞生物学自然评论》，第5卷，第198-208页)，Bedard et al.(2005)Journal of Experimental Botany56：2287-2320(Bedard等人，2005年，《实验植物学杂志》，第56卷，第2287-2320页)，Kessler et al.(2006)Traffic7：248-257(Kessler等人，2006年，《运输》，第7卷，第248-257页)以及Smith et al.(2006)Canadian Journal of Botany84：531-542(Smith等人，2006年，《加拿大植物学杂志》，第84卷，第531-542页)。一旦叶绿体前体进入基质，转运肽将被切割，留下蛋白的剩余部分，而呈现其最终构象或者参与多种不同排序途径之一。参见Keegstra et al.(1999)Plant Cell11：557-570(Keegstra等人，1999年，《植物细胞》，第11卷，第557-570页)，Jarvis et al.(2004)(Jarvis等人，2004年)以及Gutensohn et al.(2006)Journal of Plant Physiology163：333-347(Gutensohn等人，2006年，《植物生理学杂志》，第163卷，第333-347页)。

需要能使异源多肽靶向叶绿体的方法和组合物。

发明内容

提供了用于使目标多肽靶向叶绿体的方法和组合物。提供了重组多核苷酸，所述重组多核苷酸包含可操作连接至目标异源多核苷酸的编码嵌合叶绿体转运肽(CTP)的核苷酸序列。在具体实施例中，嵌合CTP包含可操作连接至中央结构域的N端结构域，中央结构域又可操作连接至CTP的C端结构域，从而形成具有CTP活性的嵌合叶绿体转运肽。进一步提供了含有该重组多核苷酸的细胞、植物细胞、植物、种子和编码相同(嵌合CTP)的重组多肽。还提供了多种序列的使用方法。

附图说明

图1提供了开发本文所提供的重组叶绿体转运肽的策略。提供了重组叶绿体转运肽的CTP骨架的每一段的起源。

图2提供了源自多种单子叶植物的叶绿体转运肽的氨基酸比对。突出显示了出现最频繁的氨基酸。

具体实施方式

下文将结合附图更详细地描述本发明，其中附图中只显示了本发明的一些实施例，而非全部实施例。事实上，这些发明内容可以多种不同形式实施，不应理解为受限于本文所述的实施例；相反，这些实施例提供的目的是使本发明满足适用的法律要求。类似的编号在全文中是指类似的要素。