[发明专利]用于通过添加交替电子受体改善微生物中的产品收率和产量的方法

权利要求书

1.一种重组微生物，其包含：

(a)一种或多种用于产生甘油和/或调节甘油合成的天然酶的缺失，所述一种或多种酶由gpd1、gpd2、gpp1、gpp2或fps1多核苷酸编码；

(b)用于将丙酮酸转化为乙酰-CoA和甲酸的异源丙酮酸甲酸裂解酶(PFL)，和用于将乙酰-CoA转化为乙醇的异源和/或天然的乙醛脱氢酶、醇脱氢酶或双功能乙醛/醇脱氢酶，其中所述异源丙酮酸甲酸裂解酶(PFL)，和异源和/或天然的乙醛脱氢酶、醇脱氢酶或双功能乙醛/醇脱氢酶能在工程化代谢途径中将碳水化合物源转化成乙醇；

(c)一种或多种由fdhl多核苷酸和/或fdh2多核苷酸编码的酶的缺失；和

(d)一种或多种异源多核苷酸，其编码糖解酶，其中所述糖解酶是葡糖淀粉酶。

2.权利要求1的重组微生物，其中所述重组微生物产生比不具有所述一种或多种用于产生甘油和/或调节甘油合成的天然酶的缺失的对照重组微生物更少的甘油。

3.权利要求1的重组微生物，其中所述碳水化合物源是生物质。

4.权利要求1的重组微生物，其还包含有效地连接于gpd2启动子多核苷酸的天然或异源gpd1多核苷酸，或有效地连接于gpd1启动子多核苷酸的天然或异源gpd2多核苷酸。

5.权利要求1的重组微生物，其中所述微生物产生乙醇。

6.权利要求5的重组微生物，其中所述微生物产生甲酸。

7.权利要求6的重组微生物，其中所述微生物选自酿酒酵母、乳酸克鲁维酵母、马克思克鲁维酵母、巴斯德毕赤酵母、解脂耶罗维亚酵母、多形汉森酵母、红发夫酵母、实用假丝酵母、Arxula adeninivorans、树干毕赤酵母、汉逊德巴利酵母、多型德巴利酵母、粟酒裂殖酵母、白色念珠菌和西方许旺酵母。

8.权利要求7的重组微生物，其中所述微生物是酿酒酵母。

9.权利要求1的重组微生物，其中所述PFL具有原核或真核生物来源。

10.权利要求9的重组微生物，其中所述PFL来自双歧杆菌属、埃希氏菌属、好热厌氧杆菌属、梭菌属、链球菌属、乳杆菌属、衣藻属、单鞭毛菌、新丽鞭毛菌属或芽孢杆菌属中的一种或多种。

11.权利要求9的重组微生物，其中所述PFL来自地衣芽胞杆菌、嗜热链球菌、胚芽乳杆菌、干酪乳杆菌、青春双岐杆菌、解纤维素梭菌、大肠杆菌、莱茵衣藻PflA、单鞭毛菌属E2或新丽鞭毛菌的一种或多种。

12.权利要求1的重组微生物，其中所述PFL来自青春双岐杆菌。

13.权利要求1的重组微生物，其中所述乙醛脱氢酶、醇脱氢酶或双功能乙醛/醇脱氢酶具有原核或真核生物来源。

14.权利要求1的重组微生物，其中所述乙醛脱氢酶来自C.phytofermentans。

15.权利要求1的重组微生物，其中所述双功能乙醛/醇脱氢酶来自埃希氏菌属、梭菌属、衣藻属、单鞭毛菌属或双歧杆菌属。

16.权利要求1的重组微生物，其中所述双功能乙醛/醇脱氢酶来自大肠杆菌、Clostridium phytofermentans、莱茵衣藻、单鞭毛菌属E2或青春双岐杆菌。

17.权利要求16的重组微生物，其中所述双功能乙醛/醇脱氢酶来自青春双岐杆菌或单鞭毛菌属E2。