[发明专利]突变型苏云金芽孢杆菌CRY基因及其使用方法

权利要求书

1.一种突变型Cry多肽，其与天然存在的Cry多肽相比较在选自对应于SEQ ID NO：2的氨基酸残基509、513、514、585、587、589和590以及SEQ ID NO：4的氨基酸残基508、509、510和590的至少一个位置处具有至少一个氨基酸替换，其中所述突变型Cry多肽具有杀虫活性。

2.根据权利要求1所述的突变型Cry多肽，其中所述多肽包括选自下列各项的氨基酸序列：

a)SEQ ID NO：2中示出的氨基酸序列，其具有其中氨基酸残基在选自残基509、513、514、585、587、589和590的至少一个位置中替换为不同氨基酸的至少一个氨基酸替换；

b)与(a)的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列保留所述替换；

c)与(a)的氨基酸序列具有至少98％序列同一性的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列保留所述替换。

3.根据权利要求2所述的突变型Cry多肽，其中所述氨基酸替换包括在位置509处用丙氨酸替换丝氨酸。

4.根据权利要求2所述的突变型Cry多肽，其中所述氨基酸替换包括在位置513处用丙氨酸替换缬氨酸。

5.根据权利要求2所述的突变型Cry多肽，其中所述氨基酸替换包括在位置514处用丙氨酸、组氨酸或苯基丙氨酸替换天冬酰胺。

6.根据权利要求2所述的突变型Cry多肽，其中所述氨基酸替换包括在位置585处用丙氨酸替换苏氨酸。

7.根据权利要求2所述的突变型Cry多肽，其中所述氨基酸替换包括在位置587处用丙氨酸替换丝氨酸。

8.根据权利要求2所述的突变型Cry多肽，其中所述氨基酸替换包括在位置589处用丙氨酸替换组氨酸。

9.根据权利要求2所述的突变型Cry多肽，其中所述氨基酸替换包括在位置590处用丙氨酸替换缬氨酸。

10.根据权利要求1所述的突变型Cry多肽，其中所述多肽包括选自下列各项的氨基酸序列：

a)SEQ ID NO：4中示出的氨基酸序列，其具有其中氨基酸残基在选自残基508、509、510和590的至少一个位置中替换为不同氨基酸的至少一个氨基酸替换；

b)与(a)的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列保留所述替换；

c)与(a)的氨基酸序列具有至少98％序列同一性的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列保留所述替换。

11.根据权利要求10所述的突变型Cry多肽，其中所述氨基酸替换包括在位置508处用丙氨酸替换谷氨酰胺。

12.根据权利要求10所述的突变型Cry多肽，其中所述氨基酸替换包括在位置509处用丙氨酸替换缬氨酸。

13.根据权利要求10所述的突变型Cry多肽，其中所述氨基酸替换包括在位置510处用丙氨酸、组氨酸或苯基丙氨酸替换天冬酰胺。

14.根据权利要求10所述的突变型Cry多肽，其中所述氨基酸替换包括在位置590处用丙氨酸替换丝氨酸。

15.一种多核苷酸，其具有编码根据实施例1-14中任一项所述的突变型Cry多肽的核苷酸序列。

16.一种表达盒，其包括根据权利要求15所述的多核苷酸。

17.根据权利要求16所述的表达盒，其中所述多核苷酸有效连接至在植物中驱动表达的启动子。

18.根据权利要求16所述的表达盒，其中所述多核苷酸有效连接至在微生物中驱动表达的启动子。

19.一种宿主细胞，包含根据权利要求15所述的多核苷酸。

20.一种包含根据权利要求15所述的多核苷酸的植物，其中所述多核苷酸有效连接至在所述植物中具有活性的启动子。

21.根据权利要求20所述的植物，其中所述植物为单子叶植物。

22.根据权利要求21所述的植物，其中所述单子叶植物选自玉蜀黍、甘蔗、小麦、大米、大麦、高粱和黑麦。

23.根据权利要求22所述的植物，其中所述单子叶植物为玉蜀黍。