[发明专利]使活性多肽的结合亲和力和结合特异性增强的蛋白质骨架模块

说明书

技术领域

本申请主张2011年04月18日提交的韩国专利申请第10-2011-0035613号的优先权，上述说明书全体为本申请的参考文献。

本发明涉及使活性多肽的结合亲和力或结合特异性增强的新型蛋白质骨架模块。更详细地说，本发明涉及下述的蛋白质骨架模块及其制造方法，该蛋白质骨架模块的特征在于，其包含：由序列编号1所示氨基酸序列的第1位～第19位氨基酸序列构成的多肽；包含活性多肽的多肽；和由序列编号1所示氨基酸序列的第29位～第86位氨基酸序列构成的多肽。

背景技术

若对蛋白质氨基酸序列的2级、3级结构进行分析，则大部分蛋白质由独立的结构域(或者模块)构成。结构域为结构上、功能上独立的单元。同一结构域在不同蛋白质中有一个以上的分布，一个蛋白质由不同的结构域构成。结构域的具体信息可在Prosite(Hulo N等,Nucleic Acids Res,36:D245-249,2008；网址:http://kr.expasy.org/prosite/),SMART(Letunic I等,Nucleic Acids Res,34:D257-D260,2006；网址:http://smart.embl-heidelberg.de/)等生物信息学网站上查询。

生物体分子间的相互作用(例如蛋白质-蛋白质、蛋白质-核酸等)在细胞的生长、分化、发育、细胞间/内的信号传递、物质转运等各种生命现象的产生中具有重要功能。作为现有的与目标分子特异性结合来调节生物学活性的分子，主要开发了抗体(全长或片段)。但是，抗体的问题在于其具有下述多种问题：其表达量少，溶解度低，必须要使用动物细胞的表达细胞株，精制费用高，在还原性细胞内环境中的稳定性降低等。因此，迫切需要开发出可克服抗体的问题同时还具有抗体这样的与目标分子(targeted molecules)特异性结合的特性的抗体以外的蛋白质。

为了在癌症或动脉硬化的诊断和治疗中进行使用，利用噬菌体展示等方法发掘出的肽具有低结合力、非稳定性、高免疫性等限制。有必要开发出可克服这样的问题、提高活性肽在人体内的结合力与稳定性、同时降低免疫性的新技术。

发明内容

技术课题

本发明人发现，在选择人体来源的蛋白质中的一部分进行最佳变形、插入活性肽的情况下，显示出了可使活性多肽的结合亲和力或结合特异性增强等可代替现有肽制剂和抗体制剂的优异的性质，从而完成了本发明。

本发明的其他目的在于提供一种内置有活性多肽的蛋白质骨架模块，其特征在于，其包含下述多肽依次连接而成的多肽：

a)由序列编号1所示氨基酸序列的第1位～第19位氨基酸序列构成的多肽；

b)包含活性多肽的多肽；以及

c)由序列编号1所示氨基酸序列的第29位～第86位氨基酸序列构成的多肽。

本发明的其他目的在于提供一种多聚核苷酸，其编码上述内置有活性多肽的蛋白质骨架模块。

本发明的其他目的在于提供一种表达载体，其包含上述多聚核苷酸。

本发明的其他目的在于提供一种宿主细胞，其经上述表达载体所转化。

本发明的其他目的在于提供一种内置有活性多肽的蛋白质骨架模块的制造方法，其包括对上述宿主细胞进行培养的工序。

本发明的其他目的在于提供一种诊断用组合物，其包含上述内置有活性多肽的蛋白质骨架模块作为有效成分。

本发明的其他目的在于提供一种诊断方法，其包括将上述内置有活性多肽的蛋白质骨架模块以有效量对于所需要的个体进行给药的工序。

本发明的其他目的在于提供上述内置有活性多肽的蛋白质骨架模块的用途，其用于制造诊断用制剂。

本发明的其他目的在于提供一种药物组合物，其包含上述内置有活性多肽的蛋白质骨架模块作为有效成分。

本发明的其他目的在于提供一种诊断用试剂盒，其包含上述内置有活性多肽的蛋白质骨架模块作为有效成分。

本发明的其他目的在于提供一种内置有活性多肽的蛋白质骨架模块，其特征在于，其包含下述多肽依次连接而成的多肽：

a)由序列编号1所示氨基酸序列的第1位～第19位氨基酸序列构成的多肽；

b)包含序列编号3所示的AP-1(激活蛋白(activator protein)1)的氨基酸序列的多肽；以及

c)由序列编号1所示氨基酸序列的第29位～第86位氨基酸序列构成的多肽。

本发明的其他目的在于提供一种多聚核苷酸，其编码上述内置有活性多肽的蛋白质骨架模块。