[发明专利]结合血清白蛋白的蛋白

说明书

本发明涉及能够结合血清白蛋白的氨基酸序列；涉及包含该氨基酸序列的蛋白和多肽，或基本上由该氨基酸序列组成的蛋白和多肽；涉及编码该氨基酸序列、蛋白或多肽的核酸；涉及包含该氨基酸序列、蛋白和多肽的组合物，特别是药物组合物；并且涉及该氨基酸序列、蛋白和多肽的应用。

本发明的其他方面，实施方案，优势和应用将通过本文进一步描述变得清晰。

如果任何术语在本文没有具体定义，这些术语具有在WO2009/068627或WO06/122787中给出的关于它们的定义。如果在本文中所用的任何术语在本文或在WO2009/068627/WO06/122787中没有具体定义，那么它们具有在本领域的一般含义，对于此例如参考标准书籍。

能够结合人血清白蛋白的氨基酸序列及其在多肽构建体中增加治疗相关蛋白和多肽的半衰期的应用是本领域中已知的。

例如，申请人的WO04/041865描述了针对血清白蛋白（和具体地针对人血清白蛋白）的纳米抗体，所述纳米抗体可以连接于其他蛋白(如针对需要的靶标的一个或多个其他纳米抗体)从而增加所述蛋白的半衰期。

国际申请WO06/122787描述了许多针对(人)血清白蛋白的纳米抗体。这些纳米抗体包括称为Alb-1(在WO06/122787中的SEQ ID NO:52)的纳米抗体及其人源化变体，如Alb-8(在WO06/122787中的SEQ ID NO:62)。[纳米抗体和纳米抗体是Ablynx N.V.的商标]。此外，这些可以用于延长治疗用蛋白和多肽和其他治疗用实体或结构部分的半衰期。

到第一次提交本申请之日时，针对（人）血清白蛋白的纳米抗体用于延长治疗用结构部分如纳米抗体的半衰期的应用已经通过临床试验的方式得到证实。例如，已经在I期临床试验中证实了ALX-0141的安全性，耐受性，免疫原性和药物代谢动力学(PK)，所述ALX-0141是一种包括两个针对RANK-L的纳米抗体和一个针对人血清白蛋白的纳米抗体的蛋白构建体(在伦敦的欧洲风湿病学年度代表大会(Annual European Congress of Rheumatology(EULAR)上由Ablynx N.V.在2011年5月27日提交的数据))。此外，许多Ablynx N.V.的公开的专利申请提供了具有增加的半衰期的构建体的实例，所述构建体包括一个或多个针对治疗靶标的纳米抗体和一个或多个针对血清白蛋白的纳米抗体(如Alb-8)。例如，参考WO04/041862,WO2006/122786,WO2008/020079,WO2008/142164,WO2009/068627和WO2009/147248。

尽管已经确定使用针对(人)血清白蛋白的纳米抗体(如在WO04/041865和WO06/122787中所述的那些和具体地在WO06/122787中所述的Alb-1的人源化变体)对于延长纳米抗体和其他治疗用结构部分和实体的半衰期提供了良好的和可广泛使用的方法，但是这并不意味着技术人员不会得益于针对人血清白蛋白的进一步改善的纳米抗体的获得，技术人员为此目的对所述纳米抗体进行处理。

本发明提供针对人血清白蛋白的这样的改善的纳米抗体(称为“Alb-23”;见SEQ ID NO:1)，以及该纳米抗体的许多变体(在本文也称为“Alb-23样序列”或“Alb-23变体”，关于一些非限制性实例参见SEQ ID NO’s3-11)，以及包含其的化合物，多肽和其他(蛋白)构建体(如本文进一步所述)。

改善的SEQ ID NO:1的纳米抗体及其变体可以提供的超过在WO04/041865和WO06/122787中所述的纳米抗体的优势通过本文进一步描述变得清晰。例如，但不限于，这些优势可以包括

-提高的稳定性(如通过测量Tm所确定的提高的热稳定性);和/或

-和/或提高的贮存稳定性，如例如在实施例5所述的SEC实验中所测量的);和/或

-在一些配制条件下降低的形成二聚体的倾向(例如，在一些水性制剂缓冲液中高浓度下-也见例如实施例5)。