[发明专利]可溶性整联蛋白α4突变体

说明书

技术领域

本发明涉及整联蛋白α4和整联蛋白α9所参与的疾病的治疗或预防的领域。更具体而言，本发明涉及通过可溶性整联蛋白α4突变体、对整联蛋白α4和整联蛋白α9所参与的疾病进行治疗或预防的方法。

背景技术

整联蛋白(以下称作“ITG”)是形成α链：β链为1：1的异源二聚体的跨膜受体蛋白。已知整联蛋白α4(以下称作“ITG-α4”)主要在淋巴细胞或肿瘤细胞上表达，其与血管细胞粘附分子1(VCAM1)、纤连蛋白(Fn)、连接粘附分子2(JAM2)、粘膜地址素细胞粘附分子1(MAdCAM1)、人淋巴细胞表达金属蛋白酶样解联蛋白样富含半胱氨酸的蛋白家族成员(MDC-L；解联蛋白和金属蛋白酶28(ADAM28))、血管性血友病因子(pp-vWF)或骨桥蛋白(OPN)等配体结合(非专利文献1、非专利文献2)。人们认为ITG-α4与这些配体结合，可发挥细胞粘附、迁移(例如向淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞的炎症部位迁移等)、淋巴细胞的归巢等丰富多彩的功能。迄今为止，已知ITG-α4与癌转移(非专利文献3)、多发性骨髓瘤(专利文献1)或类风湿性关节炎、支气管炎、炎症性肠道疾病、克罗恩病、多发性硬化症等炎症性疾病(非专利文献4)、急性中枢神经系统损伤(专利文献2)、HIV(专利文献3)有关，有报道称：抗ITG-α4抗体在实验性变应性脑脊髓炎、过敏症、I型糖尿病等T细胞依赖性自身免疫疾病模型中能发挥一定的效果。同样，还已知抗ITG-α4抗体对抑制过敏性肺炎、免疫复合体介导的肺部疾病、急性肾毒性肾炎、延迟性过敏症中的皮肤硬化和纤维蛋白的沉积有效，该抗ITG-α4抗体还抑制带血管蒂的心脏的同种移植的排斥反应(非专利文献1)。

如上所述，由于ITG-α4与疾病有关，所以人们期望将ITG-α4的抑制剂用作药物。实际上，作为抑制ITG-α4的功能的物质，人们研究了抗ITG-α4抗体、ITG-α4拮抗剂(专利文献4等)、ITG-α4受体拮抗剂(专利文献5等)，作为抗ITG-α4抗体的Tysabri(那他珠单抗)，已经作为多发性硬化症或克罗恩病的治疗药得到了承认。另外，还报道了以ITG-α4的胞内区中的功能模体为靶的的治疗方法(专利文献6)。

在使用抗体作为药品时，其效果由表位来决定。已知α4β1ITG经由与ITG-α5β1所结合的RGD序列(序列号1)不同的序列(LDV序列(序列号2)或QIDSPL序列(序列号3))，与其配体强力结合(非专利文献1、非专利文献2)。但是，已知例如在ITG-α4中的与Fn结合的位点和与VCAM1结合的位点相互重叠，可是在ITG-α4与VCAM1的结合中必须有钙离子的帮助，相对于此，在ITG-α4与Fn的结合中不需要钙离子，一部分抗体仅抑制ITG-α4与Fn的结合等，ITG-α4与其配体的结合具有不同的特性。另外，已知作为抗ITG-α4抗体的主要表位，存在三种不重叠的表位(非专利文献1)。

另一方面，作为与ITG-α4具有共通的配体的ITG，存在整联蛋白α9(以下称作“ITG-α9”)。有报道称：ITG-α9也与作为多发性硬化症的小鼠模型的实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)恶化有关(非专利文献5)。本发明人等迄今为止制备了抗ITG-α9抗体，并发现了它的治疗类风湿性关节炎的疗效(非专利文献6、专利文献7)。

由于ITG-α9与ITG-α4具有共通的配体，所以认为ITG-α9具有与ITG-α4类似的功能。另外，已知ITG-α9的氨基酸序列与ITG-α4的氨基酸序列具有39%的同源性，在ITG中同源性最高(非专利文献7)。

迄今为止，本申请的发明人发现：仅由ITG-α9的一部分胞外区和新的C末端氨基酸构成的可变剪接变体即α9突变体(SFα9)存在于生物体内，对SFα9的结构和功能进行了分析，并作了报道(非专利文献8)。关于ITG-α4的突变体，虽然有关于ITG-α4的多形性的报道(专利文献8)，但却没有关于可变剪接变体的报道。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：国际公开公报WO00／15247

专利文献2：国际公开公报WO01／43774

专利文献3：国际公开公报WO2008／140602

专利文献4：国际公开公报2010／126914

专利文献5：国际公开公报2006／0969807