[发明专利]白蛋白变体

权利要求书

1.一种制备多肽的方法，所述多肽是白蛋白变体、或者包括所述变体白蛋白的融合多肽，所述多肽或其融合物与参照白蛋白、或其融合物对FcRn的结合亲和力相比较，具有增加的FcRn结合亲和力，和/或与参照白蛋白、或其融合物的血浆半衰期相比较，具有增加的血浆半衰期，其中所述多肽、或所述融合多肽与FcRn的结合系数小于参照白蛋白、或其融合物与FcRn的KD的0.9X，所述方法包括：

(a)提供编码与SEQ ID NO:2具有至少98％序列同一性的亲本白蛋白的核酸；

(b)修饰步骤(a)的序列以编码多肽，所述多肽是变体白蛋白、或者包括所述变体白蛋白的融合多肽，其在一个或多个位置处具有一个或多个改变，所述改变选自SEQ ID NO:2中的T83N、N111D、N111D-K573P、N111E、N111E-K573P、N111G和N111G-K573P；

(c)将步骤(b)中的修饰序列引入到合适的宿主细胞中；

(d)使所述细胞在导致所述多肽表达的条件下在合适的生长培养基中生长；

(e)从生长培养基中回收所述多肽。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述参照是HSA，或者包括HSA的融合多肽。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述参照是由SEQ ID No:2所示的HSA。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述多肽或其融合多肽与FcRn的结合系数小于参照白蛋白、或其融合物与FcRn的0.5×KD。

5.一种多肽，所述多肽是与SEQ ID NO:2具有大于98％序列同一性的白蛋白变体、或者包括所述变体白蛋白的融合多肽，所述多肽或其融合物与参照白蛋白、或者包括所述参照白蛋白的融合多肽对FcRn的结合亲和力相比较，具有增加的FcRn结合亲和力，和/或与参照白蛋白、或其融合多肽的血浆半衰期相比较，具有增加的血浆半衰期，其中所述多肽、或所述融合多肽与FcRn的结合系数小于参照白蛋白、或其融合物与FcRn的RD的0.9X，所述多肽在一个或多个位置处包括一个或多个改变，所述改变选自SEQ ID NO:2中的T83N、N111D、N111D-K573P、N111E、N111E-K573P、N111G和N111G-K573P。

6.根据权利要求5所述的多肽，其中所述参照是HSA，或者包括HSA的融合多肽。

7.根据权利要求6所述的多肽，其中所述参照是由SEQ ID No:2所示的HSA。

8.根据权利要求5-7中任一项所述的多肽，其包括一个或多个另外的在所述多肽上提供可缀合硫醇基的改变。

9.根据权利要求5-8中任一项所述的方法，其中所述白蛋白变体、或融合多肽与FcRn的结合系数小于参照白蛋白、或其融合物与FcRn的0.5×KD。

10.根据权利要求5所述的多肽，其中所述多肽与SEQ ID NO:2的序列同一性大于99％。

11.根据权利要求5-10中任一项所述的多肽，其中所述多肽的氨基酸序列为具有一个或多个以下改变的SEQ ID NO：2：

T83N、N111D、N111D-K573P、N111E、N111E-K573P、N111G和N111G-K573P。

12.一种融合多肽，其包括根据权利要求5-11中任一项所述的多肽和选自治疗、预防、诊断、成像或其他有益的部分的融合配偶体多肽。

13.一种缀合物，其包括根据权利要求5-12中任一项所述的多肽和缀合配偶体。

14.根据权利要求13所述的缀合物，其中所述缀合配偶体是治疗、预防、诊断、成像或其他有益的部分。