[发明专利]治疗性犬免疫球蛋白及其使用方法

说明书

发明领域

本发明涉及用作可溶性细胞外介质和/或细胞表面受体拮抗剂的犬抗体或犬衍生抗体，其具有特定的重链恒定结构域。本发明延伸至所述抗体或其片段在用于选择性治疗犬个体的诸如炎症、疼痛、癌症或感染等病症的方法中的治疗用途。

发明背景

使用免疫球蛋白的恒定结构域片段(constant domain fragment)构建的重组免疫球蛋白和融合蛋白用于治疗许多人类疾病，包括炎性疾病（例如风湿性关节炎、银屑病、炎性肠病）、过敏（例如哮喘）、癌症（例如淋巴癌、乳腺癌、肠癌）、感染性疾病（例如RSV感染）、疼痛（例如骨关节炎疼痛、癌性疼痛、下背痛）和眼病（例如老年性黄斑变性）。

用于治疗的分子靶标包括细胞因子和趋化因子（例如白细胞介素-1（IL-1）、白细胞介素-5（IL-5）、粒细胞集落刺激因子（GCSF）、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子）、生长因子（例如神经生长因子（NGF）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）、肿瘤坏死因子（TNF））、细胞表面受体（例如HER-2、VEGFR、EGFR、CD20）、细胞表面结合生长因子（例如未加工的肿瘤坏死因子）、病毒（例如RSV）和补体级联成分（例如C5）。有证据表明参与疾病过程的许多其它靶标是已知的（例如，如2011年12月14日的1.3.1版IMGT/MAb-DB数据库中所述（URL:www.imgt.org/mAb-DB/query），其内容通过引用并入本文）。

天然免疫球蛋白产生不同的主要亚型，包括免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）或免疫球蛋白E（IgE），为了应对感染，这些免疫球蛋白在通过结合靶抗原的病原体识别、中和、破坏和消除中起到各种作用。免疫球蛋白G产生几种不同的同种型（也称为亚型），例如（在人类中）IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。这些抗体同种型在结构上、尤其在恒定结构域的氨基酸序列方面有差异，特别是在C1域和C2域之间的恒定结构域（Fc）的铰链区附近有差异。

不同的抗体同种型在抗体介导的下游效应子功能方面也存在不同。例如，抗体的恒定区序列可以在抗体的例如效应子功能（ADCC，补体募集固定和激活）、药代动力学和物理性质的特性上介导强大的影响。具有不同同种型的抗体在结合免疫细胞上的IgG Fc受体的能力上也存在不同。对于人类来说，IgG1和IgG3积极参与募集补体以通过血液中补体酶的级联来帮助靶标破坏（CDC：补体依赖性细胞毒性作用），类似地，IgG1和IgG3结合以结合抗原作为靶标的免疫细胞上的Fc受体，通过抗体介导细胞毒性作用（ADCC）破坏结合抗原。相比之下，IgG2和IgG4不募集补体或激活ADCC介导的攻击，仅以高亲合力简单地结合到抗原以抑制或抵消其活性。

当考虑用于疾病干预的靶标时，设计重组免疫球蛋白及由其制成的融合蛋白以考虑Fc同种型的活性。例如，当考虑旨在使用靶向杀死人癌细胞的抗体的治疗途径时，优选由IgG1或IgG3同种型Fc域构建重组免疫球蛋白，因为这些同种型的使用会驱动免疫介导破坏机制，例如CDC和ADCC。相比之下，当将敏感人体组织情况下的可溶性介质作为靶标时，Fc域被省略（例如，在人老年性黄斑变性的治疗中，优选靶向VEGF的Fab片段），或者使用IgG2或IgG4Fc域进行构建（例如，靶向神经病理性疼痛或炎症性疼痛情况下的神经生长因子，或肾炎、银屑病或风湿性关节炎病症下的补体C5）。这些考虑也适用于免疫球蛋白融合蛋白，例如基于人IgG1Fc疗法，在例如风湿性关节炎的病症的治疗中的可溶性TNF受体Fc融合蛋白。

在犬和例如鼠和马的其它物种中，免疫球蛋白亚型同样存在，但相互之间不具有足够的同源性以通过推理确定哪条序列在引发例如CDC或ADCC的下游效应子功能方面是活跃的或不活跃的。而且，免疫球蛋白的数量随物种的不同而变化（例如，犬中有四个IgG免疫球蛋白，为caIgG-A、caIgG-B、caIgG-C和caIgG-D(Tang et al.,2001)。在马中有七个IgG同种型(Wagner,2006)）。

单独由序列分析或序列同源性不可能确定非人类物种的特定免疫球蛋白同种型在介导受体结合和下游效应子功能方面是否为活跃或不活跃。但是，如果这些是已知的，将具有极大的价值，由于为了提供抗体或基于疗法的抗体的疗效，例如抗体结合片段或融合蛋白，用于抗体产生的同种型恒定结构域的选择可能是关键因素。

发明概述