[发明专利]球形节杆菌生产的酶

权利要求书

1.一种酮糖3-差向异构酶，其中，

所述酮糖3-差向异构酶能够从属于节杆菌属的微生物得到，并且具有下述（A）、（B）的底物特异性：

（A）将D-或L-酮糖的3位进行差向异构化，生成对应的D-或者L-酮糖，

（B）在D-或者L-酮糖中，相对于D-果糖和D-阿洛酮糖的底物特异性最高。

2.如权利要求1所述的酮糖3-差向异构酶，其中，

所述属于节杆菌属的微生物为球形节杆菌。

3.如权利要求1所述的酮糖3-差向异构酶，其中，

所述属于节杆菌属的微生物为球形节杆菌M30，其保藏编号为NITE BP-1111。

4.如权利要求1～3中任一项所述的酮糖3-差向异构酶，其中，

所述酮糖3-差向异构酶是通过SDS-PAGE测定的亚单位的分子量为约32kDa，通过凝胶过滤法测定的分子量为120kDa、亚单位的分子量为32kDa的同源四聚体结构。

5.如权利要求1～4中任一项所述的酮糖3-差向异构酶，其中，

所述酮糖3-差向异构酶具有下述物理化学性质（a）～（e）：

（a）最适pH

在30℃下反应30分钟，在20mM的镁Mg²⁺存在的条件下，pH为6～11；

（b）最适温度

在pH7.5下反应30分钟，在20mM的镁Mg²⁺存在的条件下，温度为60～80℃；

（c）pH稳定性

在4℃下保持24小时的条件下，至少在pH5～11的范围内稳定；

（d）热稳定性

在pH7.5下保持1小时，在4mM的镁离子Mg²⁺存在的条件下，在约50℃以下稳定；在镁离子Mg²⁺不存在的条件下，在约40℃以下稳定；

（e）通过金属离子活化

通过二价锰离子Mn²⁺、二价钴离子Co²⁺、二价钙离子Ca²⁺以及镁离子Mg²⁺活化。

6.如权利要求1～5中任一项所述的酮糖3-差向异构酶，其中，

所述酮糖3-差向异构酶具有下述的底物特异性1.～8.：

1.将D-果糖作为底物时的相对活性为43.8%，

2.将D-阿洛酮糖作为底物时的活性为100%，

3.将D-山梨糖作为底物时的相对活性为1.13%，

4.将D-塔格糖作为底物时的相对活性为18.3%，

5.将L-果糖作为底物时的相对活性为0.97%，

6.将L-阿洛酮糖作为底物时的相对活性为21.2%，

7.将L-山梨糖作为底物时的相对活性为16.6%，

8.将L-塔格糖作为底物时的相对活性为44.0%，

其中，将D-阿洛酮糖的差向异构化活性作为100，将相对于各个酮糖的活性作为相对活性来表示。

7.一种酮糖的转化方法，其特征在于，

在含有选自D-或者L-酮糖中的1种以上的溶液中，使权利要求1～6中任一项所述的酮糖3-差向异构酶作用，从而将该酮糖的3位进行差向异构化。

8.一种酮糖的制造方法，其特征在于，

在含有选自D-或者L-酮糖中的1种以上的溶液中，使权利要求1～6中任一项所述的酮糖3-差向异构酶作用，从而将该酮糖的3位进行差向异构化，生成对应的酮糖并收集该酮糖。