[发明专利]采用真菌过氧化酶的脂族烃的区域选择性氧化

权利要求书

1.一种在取代或未取代的、直链或支链的脂族烃的至少两端的第二或第三碳处引入羟基或酮基的方法，所述脂族烃具有至少5个碳并具有至少一个连接于所述第二或第三碳的氢，所述方法包括使所述脂族烃与过氧化氢和具有过氧化酶活性的多肽接触，其中所述多肽包括：

a）与SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28或29具有至少30%同一性的氨基酸序列；以及

b）由一种或多种以下基序所表示的氨基酸序列：

基序I：[FL]XX[YF]S[AN]X[FHY]G[GN]GX[YF]N （SEQ ID NO:9）；

基序II：G[GN]GX[YF]NXX[VA]AX[EH][LF]R    （SEQ ID NO:10）；

基序III：RXXRI[QE][DEQ]S[IM]ATN          （SEQ ID NO:11）；

基序IV：S[IM]ATN[PG][EQN][FM][SDN][FL]   （SEQ ID NO:12）；

基序V：P[PDK][DG]F[HFW]R[AP]             （SEQ ID NO:13）；

基序VI：[TI]XXXLYPNP[TK][GV]             （SEQ ID NO:14）；

基序VII：E[HG]DXSX[ST]RXD                （SEQ ID NO:15）。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述第二或第三碳在与所述过氧化酶接触前是未取代的。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述多肽包括以下氨基酸序列或由以下氨基酸序列组成：与SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28或29的成熟多肽，优选SEQ ID NO:2或4的成熟多肽，具有至少35%同一性，优选至少40%同一性，更优选至少45%同一性，更优选至少50%同一性，更优选至少55%同一性，更优选至少60%同一性，更优选至少65%同一性，更优选至少70%同一性，更优选至少75%同一性，更优选至少80%同一性，更优选至少85%同一性，最优选至少90%同一性，且特别至少95%同一性。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的方法，其中所述多肽包括以下或由以下组成：SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28或29的氨基酸序列，优选SEQ ID NO:2或4的氨基酸序列；或其具有过氧化酶活性的片段。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的方法，其中所述脂族烃的取代基选自卤素、羟基、羧基、氨基、硝基、氰基、巯基、磺酰基、甲酰基、乙酰基、甲氧基、乙氧基、苯基、苄基、二甲苯基、氨基甲酰基和氨磺酰基。

6.根据权利要求1～5中任一项所述的方法，其中所述取代基选自氯、羟基、羧基和磺酰基；特别是氯和羧基。

7.根据权利要求1～6中任一项所述的方法，其中所述脂族烃是烷烃。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述烷烃是戊烷、己烷、庚烷、辛烷、壬烷、癸烷、十一烷、十二烷、十三烷、十四烷、十五烷或十六烷、或其异构体。

9.根据权利要求7所述的方法，其中所述烷是十一烷、十二烷、十三烷、十四烷、十五烷或十六烷、或其异构体。

10.根据权利要求1～9中任一项所述的方法，其中所述脂族烃是未取代的。

11.根据权利要求1～10中任一项所述的方法，其中所述脂族烃是直链的。

12.根据权利要求1～11中任一项所述的方法，其中通过引入两个羟基将所述脂族烃转化为二醇。

13.一种制备聚氨酯的酶法，包括根据权利要求12所述的方法将脂族烃转化为二醇，以及使用所述二醇制备聚氨酯。

14.根据权利要求12所制备的二醇用于制备聚氨酯的用途。

15.过氧化酶用于在脂族烃的两个或更多端的第二或第三碳处引入羟基或酮基的用途。