[发明专利]多价免疫球蛋白的浓缩物的制造方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于治疗使用的多价免疫球蛋白浓缩物的制造方法。

背景技术

免疫球蛋白(Ig)由B淋巴细胞和浆细胞(plasmocytes)合成，其分布于血浆、血管外液及分泌物中。根据其蛋白质结构，可被分为5个种类：IgG、IgA、IgM、IgE和IgD。其在人体内的自然分布为：75%的IgG，20%的IgA，5%的IgM，以及<1%的IgE和IgD。一般来说，每公升的血浆中含有8至15g的IgG。在血浆中，循环性IgG免疫球蛋白的半衰期为约21天，IgA、IgM、IgD和IgE则小于7天。

相对于针对各种传染性病原的抗体具有高度多样性，人源多价免疫球蛋白和所使用的药学组成有97%为IgG。

富含多价免疫球蛋白的人类血浆成分已知可用于治疗各种先天性感染或缺陷。可通过施用多价或一般免疫球蛋白以改善原发性免疫缺陷和继发性缺陷(白血病、骨髓瘤或复发性感染)。其可从特定抗体(抗-恒河猴(Rhesus)或抗-D毒性抗体)中分离。其可以非常高的剂量，高达2g/kg/day，以缓和病情的发展，目前对病理生理所知甚少，但其中包含免疫形式的部分。施用多价免疫球已显示至少可暂时治疗免疫性的血小板减少，也称为免疫性血小板缺乏紫斑症。多价免疫球蛋白也可用于治疗Guillain-Barré’s症候群、脱髓鞘多发性神经炎、多发性硬化症、肌无力Lambert-Eaton’s症候群、皮肌炎。

多价免疫球蛋白含有多种分子，因此其作用机制复杂：作用发生于多个层次，其改变病患免疫系统的平衡，且因此达到治疗效果。

目前已知许多多价免疫球蛋白的制造方法。最佳的制造方法包含多个乙醇沉淀步骤(Cohn et al.1946,J.Am.Chem.Soc.68,459)。

特别是专利EP0703922(Laboratoiredu Fractionnement et des Biotechnologies,“Concentréd'immunoglobulines Gàusage thérapeutique et procédéde production dudit concentré”(Immunoglobulin G concentrate for therapeutic use and method for producing said concentrate))揭示一种由人类血浆或冷冻沉淀血浆上清液制造免疫球蛋白G的方法。该方法不包含乙醇沉淀，且包括一系列的层析步骤和利用溶剂/界面活性剂的病毒去活化步骤。由于一系列的层析步骤，使得该方法的产率比较低，该方法实质上包括2个阴离子及阳离子交换串联循环，以及2个超过滤步骤。

专利EP1385886(Laboratoiredu Fractionnement et des Biotechnologies,“Procédéde préparation de concentrés d’immunoglobulines humainesàusage thérapeutique”(Method for preparing human immunoglobulin concentrates for therapeutic use))揭示一种人类免疫球蛋白的制造方法，包括脂质及蛋白质沉淀污染物的前纯化，以及阴离子交换树脂和碱性pH环境的层析步骤。该方法可获得每公升起始处理血浆4g以上的免疫球蛋白。

Tanaka K.等人2000(“High quality human immunoglobulin G purified from Cohn fractions by liquid chromatography”Braz J Med Bio Res2000,33(1):27-30)揭示一种由Cohn’s方法获得的“I+II+II”和“II+III”部分来纯化免疫球蛋白G的方法，其利用3种胶体的层析分离，2种离子交换胶体(Q-Sepharose FF和CM-Sepharose FF)以及1种过滤胶体(Sephacryl S-300HR)。该方法可获得每公升血浆4.3±0.2g以上的免疫球蛋白G。

然而，可用免疫球蛋白治疗的适应症大量增加，免疫球蛋白的需求量也显著提升，且须确保最终产物具有高纯度且无病毒无染。

因此，本发明的目的为提供一种人类多价免疫球蛋白浓缩物的制造方法，相比较于已知的方法，其具有更高的产率。

发明内容