[发明专利]改善心脏功能的基于细胞和基因的方法

权利要求书

1.一种改善哺乳动物的心脏功能的方法，包括：

将心肌细胞移植至所述哺乳动物的心肌，其中所述心肌细胞包含含有编码核糖核苷酸还原酶亚基R1的第一核酸序列的第一表达载体和含有编码核糖核苷酸还原酶亚基R2的第二核酸序列的第二表达载体，所述第一核酸序列和第二核酸序列有效地连接于启动子，所述启动子诱导R1和R2的过表达，从而产生dATP以改善哺乳动物的心脏功能。

2.权利要求1的方法，其中所述表达载体是病毒载体。

3.权利要求2的方法，其中所述表达载体是腺伴随病毒载体。

4.权利要求1的方法，其中所述表达载体还包含转导报道物。

5.权利要求1的方法，其中所述心肌细胞来源于人胚胎干细胞。

6.权利要求5的方法，其中所述心肌细胞来源于胚胎干细胞(ESC)、诱导的多能干细胞(iPSC)或间充质干细胞。

7.权利要求6的方法，其中所述iPSC来源于从哺乳动物收获的细胞。

8.权利要求7的方法，其中所述从哺乳动物收获的细胞是成纤维细胞。

9.权利要求1的方法，其还在所述移植步骤之前包括：

提供所述第一表达载体和第二表达载体；和

用所述第一和第二表达载体离体转导所述心肌细胞。

10.权利要求1的方法，其中所述心肌是梗塞的心肌。

11.权利要求1的方法，其中所述移植包括通过导管递送心肌细胞。

12.权利要求11的方法，其中所述移植包括将心肌细胞递送至梗塞心肌的非梗塞区域。

13.权利要求1的方法，其中所述哺乳动物是人。

14.权利要求1的方法，其中所述启动子是心脏特异性启动子。

15.权利要求1的方法，其中所述启动子选自CK7启动子和CMV启动子。

16.权利要求1的方法，其中所述第一和第二表达载体是相同的。

17.一种将dATP递送至哺乳动物宿主的心肌的方法，包括将供体细胞移植至心肌，其中所述供体细胞过表达核糖核苷酸还原酶亚基R1和核糖核苷酸还原酶亚基R2，并且原位产生dATP，所述供体细胞与哺乳动物宿主的心肌细胞形成缝隙连接，从而将dATP递送至哺乳动物宿主的心肌。

18.权利要求17的方法，其中所述哺乳动物宿主是人。

19.权利要求17的方法，其中所述心肌是梗塞的心肌。

20.权利要求17的方法，其中所述移植包括通过导管递送供体细胞。

21.权利要求19的方法，其中所述移植包括将心肌细胞递送至梗塞心肌的非梗塞区域。

22.权利要求17的方法，其中所述供体细胞选自心肌细胞和成纤维细胞。

23.权利要求22的方法，其中所述心肌细胞来源于人胚胎干细胞。

24.权利要求22的方法，其中所述心肌细胞来源于胚胎干细胞(ESC)、诱导的多能干细胞(iPSC)或间充质干细胞。

25.权利要求24的方法，其中所述iPSC来源于从所述哺乳动物宿主收获的细胞。

26.权利要求25的方法，其中所述从哺乳动物宿主收获的细胞是成纤维细胞。

27.权利要求22的方法，其中所述供体细胞包含含有编码核糖核苷酸还原酶亚基R1的第一核酸序列的第一表达载体和含有编码核糖核苷酸还原酶亚基R2的第二核酸序列的第二表达载体，所述第一核酸序列和第二核酸序列有效地连接于诱导R1和R2的过表达的启动子。

28.权利要求27的方法，其中所述第一和第二表达载体是同一的载体。

29.一种改善哺乳动物的心脏功能的方法，包括施用含有编码核糖核苷酸还原酶亚基R1的第一核酸序列的第一病毒载体和含有编码核糖核苷酸还原酶亚基R2的第二核酸序列的第二病毒载体，所述第一核酸序列和第二核酸序列有效地连接于心脏特异性启动子。