[发明专利]修饰的生物素结合蛋白及其融合蛋白和应用

权利要求书

1.由SEQ ID NO:1的氨基酸序列组成的可溶性重组生物素结合蛋白。

2.包含(i)可溶性生物素结合蛋白以及(ii)抗原蛋白质或抗原肽的融合蛋白，所述可溶性生物素结合蛋白由与SEQ ID NO:1相同或与SEQ ID NO:15相同的氨基酸序列组成。

3.如权利要求2所述的融合蛋白，其中，所述可溶性生物素结合蛋白由与SEQ ID NO:1相同的氨基酸序列组成，并且其中，所述可溶性生物素结合蛋白与所述抗原蛋白质或抗原肽通过肽接头彼此相连。

4.如权利要求3所述的融合蛋白，其中，所述肽接头包含氨基酸序列SEQ ID NO:22。

5.如权利要求2所述的融合蛋白，其中，所述抗原蛋白质或抗原肽为选自于由下列抗原所组成的组中的抗原：

肺炎球菌抗原、结核抗原、炭疽抗原、HIV抗原、季节性流感抗原或流行性流感抗原、百日咳抗原、金黄色葡萄球菌抗原、脑膜炎球菌抗原、嗜血杆菌抗原、HPV抗原、大肠杆菌抗原、沙门氏菌属抗原、肠杆菌属抗原、假单胞菌属抗原、克雷伯氏菌属抗原、柠檬酸杆菌属抗原、梭菌属抗原、志贺氏菌属抗原、病原性弯曲杆菌属抗原、霍乱弧菌抗原、类毒素、毒素、或毒素部分，或以上抗原的组合。

6.如权利要求2所述的融合蛋白，其中，所述抗原蛋白质或抗原肽为抗原，所述抗原为金黄色葡萄球菌α-溶血素的非溶血性变体。

7.如权利要求6所述的融合蛋白，其中，所述金黄色葡萄球菌α-溶血素的非溶血性变体包含位于野生型金黄色葡萄球菌α-溶血素第205位、213位或209-211位氨基酸残基处的突变。

8.如权利要求6所述的融合蛋白，其中，所述金黄色葡萄球菌α-溶血素的非溶血性变体包含野生型金黄色葡萄球菌α-溶血素中的下列突变中的一种：

(i)第205位残基由W变为A；(ii)第213位残基由W变为A；或者(iii)第209-211位残基由DRD变为AAA。

9.如权利要求6所述的融合蛋白，其中，所述金黄色葡萄球菌α-溶血素的非溶血性变体包含选自于由下列氨基酸序列所组成的组中的氨基酸序列：

SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:25，以及上述氨基酸序列的功能变体和部分。

10.如权利要求2所述的融合蛋白，其中，所述融合蛋白在N端包含细菌信号序列。

11.如权利要求2所述的融合蛋白，其中，所述融合蛋白包含选自于由下列氨基酸序列所组成的组中的氨基酸序列：

SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28。

12.如权利要求6所述的融合蛋白，其中，所述融合蛋白的溶血活性比等同效价的野生型α-溶血素(Hla)低至少25％。

13.如权利要求6所述的融合蛋白，其中，所述α-溶血素由金黄色葡萄球菌野生型α-溶血素第27-319位氨基酸的氨基酸序列组成。

14.如权利要求2-13中任一项所述的融合蛋白在制造用于在受试者中诱发免疫应答的免疫原性组合物中的用途。

15.如权利要求14所述的用途，其中，所述免疫应答为抗体应答或B细胞应答。

16.如权利要求14所述的用途，其中，所述免疫应答为CD4+ T细胞应答，所述CD4+ T细胞应答包括Th1应答、Th2应答或Th17应答；或CD8+ T细胞应答；或CD4+/CD8+ T细胞应答。

17.如权利要求14所述的用途，其中，所述免疫应答为抗体应答或B细胞应答；以及T细胞应答。