[发明专利]切断mRNA的多聚（A）链和/或3’末端序列的一部分而抑制翻译反应的技术

说明书

【技术领域】

本发明涉及切断目标mRNA的多聚（A）链和/或3’末端序列的一部分，进而抑制目标基因的翻译反应的技术。

【背景技术】

作为人为地限制基因表达的方法，有RNAi法（专利文献1、非专利文献1）、核酶法（专利文献2、3、非专利文献2）及反义法（专利文献4、5、非专利文献3）。RNAi法或核酶法是通过由与目标mRNA特异性地结合的核酸等诱导目标mRNA的特异性分解来抑制基因表达的方法。反义法是通过由与目标mRNA特异性地结合的核酸等使目标mRNA形成双链来诱导抑制翻译反应或抑制正常的剪接反应而抑制基因表达的方法。

RNAi法或核酶法是依赖于经目标mRNA内的由数十碱基组成的特异序列（目标序列）诱导切断mRNA的活性的方法。由于mRNA的长度一般是1000个碱基以上，必需要对可能得到目的效果的目标序列进行选择。虽然有软件等的，但没实质的内容，现状是，对于多个位点作为目标进行预实验，从中选择有效果的目标序列。

另一方面，在反义法中，虽然目标序列限定于翻译起始密码子周边和剪接接头部位，但前者由于无法在mRNA水平检测反义效果，从而确认效果的判断是烦琐的。另外，后者虽然可在mRNA水平检测效果，难以评价是否是丧失了功能的蛋白质。

【现有技术文献】

【专利文献】

专利文献1:特开2009-291209

专利文献2:WO92/03456

专利文献3:专利第2708960号

专利文献4:WO88/04300A1

专利文献5:专利第2530906号

【非专利文献】

非专利文献1：Nature.2009Jan22;457(7228):396-404.On the road to reading the RNA-interference code.Siomi H,Siomi MC.

非专利文献2：Chem Senses.1998Apr;23(2):249-55.Current status of antisense DNA methods in behavioral studies.Ogawa S,Pfaff DW.

非专利文献3：Trends Genet.1996Dec;12(12):510-5.Anti-gene therapy:the use of ribozymes to inhibit gene function.Couture LA,Stinchcomb DT.

【发明内容】

【发明要解决的技术课题】

本发明旨在提供相比以往方法（RNAi法－核酶法－反义法）设计更为简便，并且效果的确认也更容易的人为的基因表达抑制方法。

【解决课题的技术方案】

本发明人发现，通过选择性地删除mRNA的多聚（A）链和/或3’末端序列的一部分可抑制翻译反应，由此可达到特异性的基因表达抑制效果，从而完成本发明。

本发明的要点如下。

（1）抑制目标基因的翻译反应的方法，其包括切断目标mRNA的多聚（A）链和/或3’末端序列的一部分。

（2）（1）所述的方法，其中使用可与目标mRNA的多聚（A）链和/或3’末端序列的一部分杂交的核糖核酸切断目标mRNA的多聚（A）链和/或3’末端序列的一部分。

（3）（2）所述的方法，其中核糖核酸由与从目标mRNA的多聚（A）链结合部位开始直至上游40位核苷酸的区域的序列的全部或一部分互补的核苷酸序列组成。

（4）（3）所述的方法，其中从目标mRNA的多聚（A）链结合部位开始直至上游40位核苷酸的区域的序列的全部或一部分含聚A信号序列的全部或一部分。

（5）（3）或（4）所述的方法，其中核糖核酸是20～25聚体。

（6）（2）～（5）中任一项所述的方法，其中核糖核酸由天然型的核苷酸组成。

（7）（6）所述的方法，其中核糖核酸是双链RNA。

（8）（2）～（5）中任一项所述的方法，其中核糖核酸含至少1个的核苷酸类似物。

（9）（8）所述的方法，其中核糖核酸是单链。

（10）（9）所述的方法，其中单链核糖核酸是反义吗啉代寡核苷酸。

（11）用于抑制目标基因的翻译反应的试剂盒，其含可切断目标mRNA的多聚（A）链和/或3’末端序列的一部分的试剂。