[发明专利]纳米凝胶

说明书

发明领域

本发明涉及聚合杂交核心-壳纳米载体(polymeric hybrid core-shell nanocarrier)的设计和制备，其中将所述核心设计为结合治疗性有效负载(therapeutic payload)(优选治疗性核苷酸、肽、蛋白质和小分子药物)，并且将所述壳设计为保护所述治疗性有效负载，稳定纳米载体，提供对于系统的生物相容性，使其能够靶向特定细胞和组织，并且促进治疗性有效负载从纳米载体的有效的细胞内释放。

更特别地，本发明涉及PA聚合物、由所述PA聚合物制备的毫微粒(nanoparticle)和纳米凝胶，其中所述纳米凝胶可包含选自RNA(特别是siRNA或miRNA)或者其衍生物或片段、DNA或者其衍生物或片段、(寡)肽及其衍生物，以及蛋白质及其衍生物的生物活性组分。

发明背景

本发明的发明领域为siRNA的递送(siRNA意指小干扰RNA，其也称作短干扰RNA或沉默RNA)和miRNA的递送(miRNA意指微RNA)。

由于RNA干扰(RNAi)以序列特异性方式沉默基因表达的能力，其代表影响致病基因表达的有前景的策略。筛选不同的siRNA序列导致了数种不同治疗应用的有潜力的治疗寡核苷酸的确认。然而，siRNA的递送是主要问题。在生物流体中，裸siRNA通过核酸酶快速降解(半衰期为大约几分钟)，并且通常需要载体来在细胞外环境中提供防止降解的充分保护，并且确保在细胞内摄取和处理期间有效地穿过细胞屏障。特别地，高度负电荷的siRNA仅可十分困难的穿过细胞膜。此外，一旦在细胞内液中，siRNA需要从载体上有效地卸载，以表现其治疗活性。因此，已研究了多种用于有效递送RNA、DNA和siRNA的非病毒聚合物载体。

全部通过援引加入的US 2002/0131951(现在为US 6.998.115)、US 2004/0071654(现在为US 7.427.394)、US 2005/0244504和US 2010/0036084，公开了由双丙烯酰胺和官能化的伯胺制备的聚(氨基酯)聚合物。在它们的阳离子形式中，聚(氨基酯)聚合物与DNA分子或其片段形成络合物。

通过援引加入的US 2008/0242626公开了基于双丙烯酰胺和官能化的伯胺的聚(氨基酯)聚合物，其中将所述聚(氨基酯)聚合物进行末端修饰。其中所述聚(氨基酯)聚合物是氨基取代的，将聚(氨基酯)聚合物与亲电体反应。其中所述聚(氨基酯)聚合物是丙烯酸酯取代的，将聚(氨基酯)聚合物与亲核体反应。这些末端修饰的聚(氨基酯)聚合物用于DNA和RNA的递送。

通过援引加入的WO 2010/065660公开了可生物降解的聚二硫化胺(polydisulfide amine)及其与如RNA、DNA、siRNA和其它寡核苷酸的络合物。

通过援引加入的US 2010/0041739公开了可用于如DNA递送的聚亚烷基亚胺聚合物。

通过援引加入的US 2010/0028445公开了包含侧挂(pendant)二硫基、侧挂巯基或侧挂活化巯基的聚(酰胺胺)聚合物，以及制备这样的聚(酰胺胺)聚合物的方法，其中将双丙烯酰基单体与伯胺和/或仲二胺反应，其中所述胺中的一个包含二硫基。通过在聚(酰胺胺)链之间形成二硫基，可将聚(酰胺胺)聚合物转化为水凝胶。

通过援引加入的C.Lin等人,Bioconjug.Chem.18,138-145,2007，公开了包含二硫键的聚(酰胺胺)，其通过伯胺和包含二硫基的N,N’-胱胺双丙烯酰胺的Michael加成来制备。

通过援引加入的L.J.van der Aa等人,J.Control.Release148,e85,2010，公开了包含二硫键的聚(酰胺胺)，其通过伯氨基醇、包含二硫基的N,N’-胱胺双丙烯酰胺和1,2-二氨基乙烷的Michael加成来制备。

通过援引加入的R.Namgung等人,Biotechnol.Lett.32,755,2010，公开了包含二硫键的聚(酰胺胺)，其通过4-氨基-1-丁醇和包含二硫基的N,N’-胱胺双丙烯酰胺的Michael加成来制备。

通过援引加入的P.vader等人,Pharm.Res.28,1013,2011，公开了包含二硫键的聚(酰胺胺)，其通过4-氨基-1-丁醇、包含二硫基的N,N’-胱胺双丙烯酰胺和1,2-二氨基乙烷的Michael加成来制备。