[发明专利]由蛋白G细胞膜外结构域突变体的串联型多聚体组成的新型改性蛋白无效

专利信息
申请号: 201280038040.4 申请日: 2012-08-03
公开(公告)号: CN103748221A 公开(公告)日: 2014-04-23
发明(设计)人: 本田真也;松丸裕之;渡边秀树;吉田昼也 申请(专利权)人: 独立行政法人产业技术综合研究所;株式会社大赛璐
主分类号: C12N15/09 分类号: C12N15/09;C07K14/315;C07K17/00;C07K19/00;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10
代理公司: 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 代理人: 李英
地址: 日本*** 国省代码: 日本;JP
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摘要:
搜索关键词: 蛋白 细胞膜 结构 突变体 串联 型多聚体 组成 新型 改性
【权利要求书】:

1.蛋白质,其由对具有免疫球蛋白G的Fc区域的蛋白质有结合活性的、细胞膜外结构域突变体的串联型多聚体组成。

2.权利要求1所述的蛋白质,其为串联型三聚体、串联型四聚体、或者串联型五聚体。

3.权利要求1或2所述的蛋白质,其中构成多聚体的细胞膜外结构域突变体彼此相同。

4.权利要求1~3中任一项所述的蛋白质,其中各细胞膜外结构域突变体由接头序列连结。

5.权利要求1~4中任一项所述的蛋白质,其中对具有免疫球蛋白G的Fc区域的蛋白质有结合活性的细胞膜外结构域是链球菌(Streptococcus)属链球菌的蛋白G的B1、B2、或B3中的任一种。

6.权利要求1~5中任一项所述的蛋白质,其对免疫球蛋白G的Fc区域有结合活性,并且相比由野生型蛋白G·B结构域的串联型多聚体组成的蛋白质,至少,其对免疫球蛋白G的Fab区域的结合活性和/或对Fc区域在弱酸性区域的结合活性降低。

7.权利要求1~6中任一项所述的蛋白质,其中构成多聚体的至少一个细胞膜外结构域突变体是以下的突变体蛋白质:

是野生型蛋白G·B1结构域蛋白质的突变体蛋白质,由以下的(a)所示的氨基酸序列组成,或由在(a)所示的氨基酸序列中,缺失、取代、插入或附加1个或数个氨基酸残基的氨基酸序列组成,其对免疫球蛋白G的Fc区域有结合活性,并且,相比野生型蛋白G·B1结构域蛋白质,至少,其对免疫球蛋白G的Fab区域的结合活性和/或对Fc区域在弱酸性区域的结合活性降低:

(a)AspThrTyrLysLeuIleLeuAsnGlyLysX11LeuLysGlyGluThrX17ThrGluAlaValX22AlaAlaX25AlaGluLysValPheLysX32TyrAlaX35X36X37GlyValX40GlyX42TrpThrTyrAspX47X48ThrLysThrPheThrValThrGlu

(上述氨基酸序列中,X35表示Asn或Lys,X36表示Asp或Glu,X37表示Asn、His、或者Leu,X47表示Asp或Pro,X48表示Ala、Lys或Glu,X22表示Asp或His,X25表示Thr或His,X32表示Gln或His,X40表示Asp或His,X42表示Glu或His,X11表示Thr或Arg,X17表示Thr或Ile;不过,同时X35是Asn或Lys、X36是Asp或Glu、X37是Asn或Leu、X47是Asp或Pro、X48是Ala、Lys或Glu、X22是Asp、X25是Thr、X32是Gln、X40是Asp、X42是Glu、X11是Thr,并且排除X17是Thr的情况)。

8.权利要求1~6中任一项所述的蛋白质,其中构成多聚体的至少一个细胞膜外结构域突变体是以下的突变体蛋白质:

是野生型蛋白G·B2结构域蛋白质的突变体蛋白质,由以下的(b)所示的氨基酸序列组成,或由在(b)所示的氨基酸序列中,缺失、取代、插入或附加1个或数个氨基酸残基的氨基酸序列组成,其对免疫球蛋白G的Fc区域有结合活性,并且,相比野生型蛋白G·B2结构域蛋白质,至少,其对免疫球蛋白G的Fab区域的结合活性和/或对Fc区域在弱酸性区域的结合活性降低:

(b)ThrThrTyrLysLeuValIleAsnGlyLysX11LeuLysGlyGluThrX17ThrGluAlaValX22AlaAlaX25AlaGluLysValPheLysX32TyrAlaX35X36X37GlyValX40GlyX42TrpThrTyrAspX47X48ThrLysThrPheThrValThrGlu

(上述氨基酸序列中,X35表示Asn或Lys,X36表示Asp或Glu,X37表示Asn、His、或者Leu,X47表示Asp或Pro,X48表示Ala、Lys或Glu,X22表示Asp或His,X25表示Thr或His,X32表示Gln或His,X40表示Asp或His,X42表示Glu或His,X11表示Thr或Arg,X17表示Thr或Ile;不过,同时X35是Asn或Lys、X36是Asp或Glu、X37是Asn或His、X47是Asp或Pro、X48是Ala、Lys或Glu、X22是Asp、X25是Thr、X32是Gln、X40是Asp、X42是Glu、X11是Thr,并且排除X17是Thr的情况)。

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