[发明专利]使得在细菌中能够更快地利用蔗糖的变体蔗糖转运蛋白多肽

权利要求书

1.变体蔗糖转运蛋白多肽，所述多肽具有：

(a)基于Clustal W比对方法，与如SEQ ID NO：24所示的氨基酸序列具有至少95％同一性的氨基酸序列，并且具有至少一种选自下列的氨基酸改变：

(i)在位置61处将亮氨酸变为脯氨酸；

(ii)在位置159处将苯丙氨酸变为亮氨酸；

(iii)在位置162处将甘氨酸变为半胱氨酸；

(iv)在位置169处将脯氨酸变为组氨酸；

(v)在位置61处将亮氨酸变为色氨酸；

(vi)在位置61处将亮氨酸变为组氨酸；

(vii)在位置61处将亮氨酸变为苯丙氨酸；以及

(viii)在位置61处将亮氨酸变为酪氨酸；或

(b)基于Clustal W比对方法，与如SEQ ID NO：44所示的氨基酸序列具有至少95％同一性的氨基酸序列，并且从N-末端具有402至407个氨基酸的长度；或

(c)基于Clustal W比对方法，与如SEQ ID NO：44所示的氨基酸序列具有至少95％同一性的氨基酸序列，并且从N-末端具有402至407个氨基酸的长度，并且具有至少一种(a)的氨基酸改变。

2.细菌，所述细菌在其基因组中或在至少一个重组构建体上包含：

(a)编码变体蔗糖转运蛋白多肽的核苷酸序列，所述多肽具有：

(i)基于Clustal W比对方法，与如SEQ ID NO：24所示的氨基酸序列具有至少95％同一性的氨基酸序列，并且具有至少一种选自下列的氨基酸改变：

(A)在位置61处将亮氨酸变为脯氨酸；

(B)在位置159处将苯丙氨酸变为亮氨酸；

(C)在位置162处将甘氨酸变为半胱氨酸；

(D)在位置169处将脯氨酸变为组氨酸；

(E)在位置61处将亮氨酸变为色氨酸；

(F)在位置61处将亮氨酸变为组氨酸；

(G)在位置61处将亮氨酸变为苯丙氨酸；以及

(H)在位置61处将亮氨酸变为酪氨酸；或

(ii)基于Clustal W比对方法，与如SEQ ID NO：44所示的氨基酸序列具有至少95％同一性的氨基酸序列，并且从N-末端具有402至407个氨基酸的长度；或

(iii)基于Clustal W比对方法，与如SEQ ID NO：44所示的氨基酸序列具有至少95％同一性的氨基酸序列，并且从N-末端具有402至407个氨基酸的长度，并且具有至少一种(i)的氨基酸改变；以及

(b)编码具有蔗糖水解酶活性的多肽的核苷酸序列；

其中(a)和(b)各自可操作地连接至相同的或不同的启动子，进一步地，其中所述细菌以比包含具有如SEQ ID NO：24所示的氨基酸序列的野生型蔗糖转运蛋白多肽的细菌更高的速率代谢蔗糖。

3.根据权利要求2所述的细菌，其中所述具有蔗糖水解酶活性的多肽归类为EC3.2.1.26或EC2.4.1.7。

4.根据权利要求2所述的细菌，所述细菌在其基因组中或在至少一个重组构建体上还包含编码具有果糖激酶活性的多肽的核苷酸序列。

5.根据权利要求4所述的细菌，其中所述具有果糖激酶活性的多肽归类为EC2.7.1.4、EC2.7.1.3或EC2.7.1.1。

6.根据权利要求2所述的细菌，其中所述细菌选自下列属：埃希氏菌属(Escherichia)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter)和气杆菌属(Aerobacter)。

7.根据权利要求6所述的细菌，其中所述细菌是大肠杆菌(Escherichia coli)。

8.根据权利要求2所述的细菌，其中所述细菌是产生1，3-丙二醇、甘油和／或3-羟基丙酸的重组细菌。

9.由蔗糖制备甘油、1，3-丙二醇和／或3-羟基丙酸的方法，包括：

a)在蔗糖存在下培养权利要求8的重组细菌；以及

b)回收产生的甘油、1，3-丙二醇和／或3-羟基丙酸。