[发明专利]针对GPCR:G蛋白复合物的结合结构域及来自其的用途

权利要求书

1.结合结构域，其针对和/或特异性结合包含GPCR和G蛋白的复合物，

其中所述结合结构域特异性结合G蛋白，而不结合GPCR，

其中所述结合结构域是包含这样的氨基酸序列的免疫球蛋白单可变结构域，所述氨基酸序列包含根据下列通式(1)的4个框架区(FR1至FR4)和3个互补决定区(CDR1至CDR3)：FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4(1)，

其中CDR1是SEQ ID NO:13，CDR2是SEQ ID NO:25，且CDR3是SEQ ID NO:37；或者

其中CDR1是SEQ ID NO:14，CDR2是SEQ ID NO:26，且CDR3是SEQ ID NO:38；或者

其中CDR1是SEQ ID NO:15，CDR2是SEQ ID NO:27，且CDR3是SEQ ID NO:39；或者

其中CDR1是SEQ ID NO:16，CDR2是SEQ ID NO:28，且CDR3是SEQ ID NO:40；或者

其中CDR1是SEQ ID NO:17，CDR2是SEQ ID NO:29，且CDR3是SEQ ID NO:41；或者

其中CDR1是SEQ ID NO:18，CDR2是SEQ ID NO:30，且CDR3是SEQ ID NO:42。

2.根据权利要求1的结合结构域，其中，相比与异源三聚体G蛋白单独结合，所述结合结构域与复合物结合的亲和力更高。

3.根据权利要求1的结合结构域，其中复合物还包含受体配体。

4.根据权利要求3的结合结构域，其中复合物由GPCR、G蛋白和受体配体组成。

5.根据权利要求3或4的任一项的结合结构域，其中所述受体配体是激动剂。

6.根据权利要求1的结合结构域，其中G蛋白处于不含核苷酸的形态中。

7.根据权利要求1的结合结构域，其特异性结合位于所述G蛋白的α和β亚基之间的界面上的构象表位。

8.根据权利要求1的结合结构域，其

a)在存在核苷酸的条件下阻止或抑制复合物解离，或

b)阻止或抑制核苷酸与G蛋白结合，或

c)能从G蛋白上移走核苷酸。

9.根据权利要求6或8的结合结构域，其中所述核苷酸是鸟嘌呤核苷酸或其类似物。

10.根据权利要求1至4和6至8的任一项的结合结构域，其中GPCR处于活性构象中。

11.根据权利要求1至4和6至8的任一项的结合结构域，其中G蛋白选自Gs、Gi、Go、Gt、Ggust、Gz、Golf、Gq、G12、G13。

12.根据权利要求1至4和6至8的任一项的结合结构域，其中GPCR选自Gs偶联受体、Gi偶联受体、Go偶联受体、Gt偶联受体、Ggust偶联受体、Golf偶联受体、Gq偶联受体、G12偶联受体、G13偶联受体。

13.根据权利要求1至4和6至8的任一项的结合结构域，其中所述GPCR是人蛋白质。

14.根据权利要求1至4和6至8的任一项的结合结构域，其中免疫球蛋白单可变结构域是纳米抗体(V_HH)。

15.根据权利要求14的结合结构域，其中纳米抗体由选自SEQ ID NO:1至6的氨基酸序列组成。

16.根据权利要求1至4和6至8的任一项的结合结构域，其中所述结合结构域包含在多肽中。

17.根据权利要求1至4和6至8的任一项的结合结构域，其中所述结合结构域被固定在固体支持物上。

18.包含根据权利要求1至17的任一项的结合结构域的复合物。

19.根据权利要求18的复合物，其还包含GPCR、G蛋白和任选的受体配体。

20.根据权利要求18至19的任一项的复合物，其是结晶的。

21.核酸序列，其编码根据权利要求1至17的任一项的结合结构域的氨基酸序列。

22.重组载体，其包含根据权利要求21的核酸序列。