[发明专利]芳族分子的重组生产系统

权利要求书

1.一种用于生产酚类化合物的修饰的重组宿主细胞，其包含

i)第一表达系统，所述系统包含至少一个能被表达的编码6-甲基水杨酸(6-MSAS)的芳族聚酮化合物合酶(PKS)的核苷酸序列，和

ii)第二表达系统，所述系统包含至少一个编码完整的酰基载体蛋白(ACP)合酶的核苷酸序列，其中所述ACP合酶将所述PKS泛酸巯基乙胺基化，和

iii)第三表达系统，所述系统包含至少一个编码脱羧酶的核苷酸序列，

使得从所述细胞分离的产物是酚类化合物。

2.根据权利要求1所述的宿主细胞，其中所述的酚类化合物是间甲酚。

3.根据权利要求1所述的宿主细胞，其中所述的酚类化合物是苔黑酚。

4.根据权利要求3所述的宿主细胞，其中所述的芳族PKS包含灭活的酮还原酶(KR)结构域。

5.根据权利要求1所述的修饰的细胞，其中所述的芳族PKS是真菌的6-甲基水杨酸合酶。

6.根据权利要求1所述的修饰的细胞，其中所述的芳族PKS是原核生物的6-甲基水杨酸合酶。

7.根据权利要求6所述的修饰的细胞，其中所述的芳族PKS由野生型形式的抗生素链霉菌的ChlB1基因编码。

8.根据权利要求3所述的修饰的细胞，其中所述的芳族PKS是由绿色产色链霉菌的AviM基因编码的苔色酸合酶(OSAS)。

9.根据权利要求1-6中任一项所述的修饰的细胞，其中编码所述的脱羧酶的所述的核苷酸序列选自由展青霉的所述6-MSA脱羧酶基因、棒曲霉的所述PatG基因、粉红粘帚霉的所述OSA脱羧酶基因、曲霉属物种的所述2,3-二羟基苯甲酸脱羧酶基因和少动鞘氨醇单胞菌SYK-6的所述5-羧基香草醛脱羧酶基因组成的组。

10.根据权利要求1所述的修饰的细胞，其中所述PKS的所述表达系统和所述完整的ACP合酶的所述表达系统存在于相同的载体上。

11.根据权利要求1所述的修饰的细胞，其中所述PKS的所述表达系统和所述完整的ACP合酶的所述表达系统存在于独立的载体上。

12.根据权利要求1所述的修饰的细胞，其中所述PKS和所述完整的ACP合酶表达自双顺反子信使RNA。

13.根据权利要求6所述的修饰的细胞，其中功能化脱羧酶的表达系统存在于相同的载体上，或独立的载体上。

14.根据权利要求7所述的修饰的细胞，其中功能化脱羧酶的表达系统存在于与所述最小PKS的表达系统或所述完整的ACP合酶的所述表达系统相同的载体上，或不同的载体上。

15.根据权利要求1所述的修饰的细胞，其中所述最小PKS的所述表达系统和所述完整的ACP合酶的所述表达系统和功能化脱羧酶的所述表达系统存在于相同的载体上。

16.根据权利要求1所述的修饰的细胞，其中一、二或全部三个所述表达系统整合到宿主细胞染色体或表达自酵母人工染色体(YAC)。

17.根据权利要求1所述的修饰的细胞，其中表达的PKS、完整的ACP合酶和脱羧酶中至少两个来源于多顺反子信使RNA。

18.根据权利要求1所述的修饰的细胞，其中所述的宿主生物体选自由巴斯德毕赤酵母和曲霉属物种组成的组。

19.根据权利要求1所述的修饰的细胞，其中所述的宿主生物体是黑曲霉。

20.根据权利要求19所述的修饰的细胞，其不含有完整的ACP合酶的异源表达系统。