[发明专利]利用单个发光粒子检测的光分析装置、光分析方法以及光分析用计算机程序有效
申请号: | 201280042499.1 | 申请日: | 2012-07-03 |
公开(公告)号: | CN103765197A | 公开(公告)日: | 2014-04-30 |
发明(设计)人: | 中田秀孝;田边哲也 | 申请(专利权)人: | 奥林巴斯株式会社 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 北京林达刘知识产权代理事务所(普通合伙) 11277 | 代理人: | 刘新宇 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 单个 发光 粒子 检测 分析 装置 方法 以及 用计 程序 | ||
1.一种光分析装置,使用共焦显微镜或多光子显微镜的光学系统检测来自在样本溶液中分散且随机运动的发光粒子的光,该光分析装置的特征在于,包括:
光检测区域移动部,其使上述光学系统的光检测区域的位置在上述样本溶液内移动;
光检测部,其按每个测量单位时间检测来自上述光检测区域的光量;以及
信号处理部,其生成一边使上述光检测区域的位置在上述样本溶液内移动一边由上述光检测部按每个上述测量单位时间检测出的来自上述光检测区域的光的按时间序列的光强度数据,在上述按时间序列的光强度数据中逐个检测表示来自各个上述发光粒子的光的信号,
其中,上述测量单位时间根据上述光检测区域的大小和位置的移动速度来决定。
2.根据权利要求1所述的光分析装置,其特征在于,
上述光检测区域的大小越大,上述测量单位时间被设定得越长,上述移动速度越高,上述测量单位时间被设定得越短。
3.根据权利要求1或2所述的光分析装置,其特征在于,
上述测量单位时间小于一个发光粒子通过上述光检测区域时的估计通过时间的一半。
4.根据权利要求1至3中的任一项所述的光分析装置,其特征在于,
上述测量单位时间被设定成一个发光粒子通过上述光检测区域时的通过时间与至少三个上述测量单位时间相重叠。
5.根据权利要求1至4中的任一项所述的光分析装置,其特征在于,
上述信号处理部对逐个检测出的表示来自上述发光粒子的光的信号的个数进行计数来对在上述光检测区域的位置的移动过程中检测出的上述发光粒子的个数进行计数。
6.根据权利要求1至5中的任一项所述的光分析装置,其特征在于,
上述光检测区域移动部使上述光检测区域的位置以比上述发光粒子的扩散移动速度快的速度移动。
7.根据权利要求1至6中的任一项所述的光分析装置,其特征在于,
上述光检测区域移动部通过变更上述光学系统的光路来使上述光学系统的光检测区域的位置在上述样本溶液内移动。
8.根据权利要求1至7中的任一项所述的光分析装置,其特征在于,
上述信号处理部在检测出具有大于规定阈值的强度的表示光的信号时,检测出一个发光粒子进入了上述光检测区域。
9.根据权利要求1至8中的任一项所述的光分析装置,其特征在于,
上述信号处理部使上述按时间序列的光强度数据平滑化,将平滑化后的上述按时间序列的光强度数据中具有超过上述规定阈值的强度的吊钟型的脉冲状信号检测为表示来自单个上述发光粒子的光的信号。
10.根据权利要求1至9中的任一项所述的光分析装置,其特征在于,
上述信号处理部根据检测出的上述发光粒子的个数来确定上述样本溶液中的发光粒子的数密度或浓度。
11.一种光分析方法,使用共焦显微镜或多光子显微镜的光学系统检测来自在样本溶液中分散且随机运动的发光粒子的光,该光分析方法的特征在于,包括以下过程:
使上述光学系统的光检测区域的位置在上述样本溶液内移动;
一边使上述光检测区域的位置在上述样本溶液内移动一边按每个测量单位时间检测来自上述光检测区域的光量,生成按时间序列的光强度数据;以及
逐个检测上述按时间序列的光强度数据中的各个表示来自各个发光粒子的光的信号,
其中,根据上述光检测区域的大小和位置的移动速度来决定上述测量单位时间。
12.根据权利要求11所述的光分析方法,其特征在于,
上述光检测区域的大小越大,将上述测量单位时间设定得越长,上述移动速度越高,将上述测量单位时间设定得越短。
13.根据权利要求11或12所述的光分析方法,其特征在于,
上述测量单位时间小于一个发光粒子通过上述光检测区域时的估计通过时间的一半。
14.根据权利要求11至13中的任一项所述的光分析方法,其特征在于,
将上述测量单位时间设定成一个发光粒子通过上述光检测区域时的通过时间与至少三个上述测量单位时间相重叠。
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