[发明专利]高滴度生产聚(α 1, 3葡聚糖)无效
申请号: | 201280043600.5 | 申请日: | 2012-09-10 |
公开(公告)号: | CN103764834A | 公开(公告)日: | 2014-04-30 |
发明(设计)人: | J.P.奧布里恩;M.S.帕伊内 | 申请(专利权)人: | 纳幕尔杜邦公司 |
主分类号: | C12P19/18 | 分类号: | C12P19/18 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 邹雪梅;李炳爱 |
地址: | 美国特拉华*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高滴度 生产 聚糖 | ||
1. 用于在反应体系中生产聚(α 1, 3葡聚糖)的方法,所述反应体系包括通过半透膜分隔开的两个室,其中:
a) 第一室包含酶反应溶液,所述酶反应溶液包含:
i) 蔗糖;和
ii) 至少一种葡糖基转移酶;并且
b) 第二室通过与所述酶反应溶液接触的半透膜与所述第一室分隔开,其中果糖能够透过所述半透膜,但聚(α 1, 3葡聚糖)不能透过所述半透膜,这有利于在将聚(α 1, 3葡聚糖)和所述至少一种葡糖基转移酶保留在所述第一室内的同时连续移除果糖和其他低分子量部分。
2. 根据权利要求1所述的方法,其中所述酶反应溶液保持在20℃至25℃的温度下。
3. 根据权利要求1所述的方法,还包含至少一种引物。
4. 根据权利要求1所述的方法,其中所述半透膜有利于将聚(α 1, 3葡聚糖)积聚至从30克/升至200克/升范围的浓度。
5. 根据权利要求1所述的方法,其中所述半透膜具有12,000至100,000道尔顿的截留分子量。
6. 根据权利要求5所述的方法,其中所述半透膜是透析管。
7. 根据权利要求1所述的方法,其中所述至少一种葡糖基转移酶来源于链球菌(streptococci)。
8. 根据权利要求7所述的方法,其中所述至少一种葡糖基转移酶选自gtfJ、gtfB、gtfC和gtfI。
9. 根据权利要求7所述的方法,其中所述葡糖基转移酶来自唾液链球菌(Streptococcus salivarius)。
10. 根据权利要求9所述的方法,其中所述唾液链球菌的葡糖基转移酶是gtfJ。
11. 根据权利要求3所述的方法,其中所述至少一种引物是葡聚糖。
12. 根据权利要求1所述的方法,其中所述葡糖基转移酶是不依赖引物的酶。
13. 根据权利要求1所述的方法,其中所述葡糖基转移酶是依赖引物的酶。
14. 根据权利要求1所述的方法,其中所述酶反应溶液中存在多于一种葡糖基转移酶。
15. 根据权利要求14所述的方法,其中所述多于一种葡糖基转移酶包括至少一种依赖引物的酶和至少一种不依赖引物的酶的混合物。
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