[发明专利]抑制细胞生长的方法、对NEK10变异基因具有RNA干扰效应的核酸分子、以及抗癌剂

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于抑制细胞生长的方法、一种对NEK10变异基因具有RNA干扰效应的核酸分子、一种用于抑制NEK10变异基因表达的组合物、一种抗癌剂和一种用于筛选抗癌剂的方法，所述组合物包含用于在细胞中表达所述核酸分子的表达载体以及所述核酸分子，所述抗癌剂具有所述核酸分子作为其活性成分。

背景技术

在现代日本，癌症是死亡的首要原因，每年有超过30,000人死于癌症。尽管在癌症的检测和治疗上已经取得了进展，但是与癌症相关的死亡率居高不下。尽管分子靶向抗癌剂（如Glivec^TM和Herceptin^TM）最近在癌症化疗使用中引起了关注，但是由于已经证明它们在患者体内的疗效是有限的，所以期望开发出新的分子靶向抗癌剂。

开始于1970年代的第一部分（first part），在构巢曲霉（Aspergillus nidulans）中发现了NIMA激酶，并且在裂殖酵母（fission yeast）中发现了Fin1形式的NIMA激酶的同源物。NIMA激酶属于丝氨酸/苏氨酸激酶家族，并且已经表明在细胞周期的M期发挥了重要的作用。也就是说，NIMA激酶明确地被确定为在进入M期、染色体凝集的控制、纺锤体的形成和胞质分裂中发挥了核心作用的分子（参见，例如，非专利文献1）。

人类NIMA激酶的同源物由NEK1～NEK11形式的NIMA-相关激酶（NEK）组成，并且这些激酶构成了NEK家族。到目前为止，所述NEK家族已知由细胞周期和信号转导途径中的重要分子组成。例如，已经报道了NEK家族成员的NEK2、NEK6、NEK7和NEK9以相同于NIMA激酶和Fin1的方式参与了进入M期、染色体凝集的控制、纺锤体的形成和胞质分裂（参见，例如，非专利文献2）。

已经报道，NEK10在控制G2/M期检查点（checkpoint）响应UV辐射中发挥了重要作用（参见，例如，非专利文献3）。已经报道，存在于NEK10基因中的SNP参与了乳腺癌的发病（参见，例如，非专利文献4和5）。然而，关于NEK10是否参与了细胞生长（且特别是癌细胞的生长）是不清楚的。此外，推定为人类NEK10变异体（variant）的分子被登记在NCBI数据库中（登录号：AK098832.1，被称为人类NEK10变异体）。尽管人类NEK10变异体由于具有类似于NEK家族其它分子的激酶节段，从而也存在参与了细胞周期控制的可能性，但是它在体内具有何种类型的功能却是未知的。

现有技术文献

专利文献

非专利文献1：M.J.O'Connell,et al.,Trends in Cell Biology,2003,Vol.13,pp.221-228

非专利文献2：L.O'Regan,et al.,Cell Division,2007,Vol.2,pp.25-36

非专利文献3：L.S.Moniz,et al.,Molecular and Cellular Biology,2011,Vol.31,pp.30-42

非专利文献4：S.Ahmed,et al.,Nature Genetics,2009,Vol.41,pp.585-590

非专利文献5：A.C.Antoniou,et al.,Cancer Research,2010,Vol.70,pp.9742-9754

发明内容

本发明所解决的问题

本发明的一个目的是提供一种用于抑制细胞生长的方法、一种可用于作为抗癌剂的核酸分子和一种筛选新的抗癌剂的方法。

用于解决所述问题的手段

本发明的发明人认为，既然在小鼠中存在与人类NEK10变异体具有同源性的分子并且NEK10变异体是跨物种保守的，那么NEK10变异体在细胞生长以及在细胞周期的控制中可能是重要的，由于NEK10变异体的生物学功能是未知的，所以对其进行了广泛的研究。结果，本发明的发明人发现，当细胞中NEK10变异体的表达被抑制时，细胞生长被抑制，并且对NEK10变异mRNA（NEK10siRNA）具有RNA干扰效应的核酸对细胞（特别是对癌细胞）具有细胞生长抑制作用，从而导致完成了本发明。

也就是说，本发明采用以下所示的构成。

(1)一种用于抑制细胞生长的方法，其包含：

表达降低步骤，其用于降低NEK10变异基因（variant gene）在细胞中的表达，或