[发明专利]新型α-1抗胰蛋白酶变体及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种α-1抗胰蛋白酶变体，该变体通过对α-1抗胰蛋白酶的N-末端的第1位至第25位之间的特定位点上的氨基酸进行取代以添加糖基化位点来制备。

2.如权利要求1所述的α-1抗胰蛋白酶变体，其中，所述α-1抗胰蛋白酶变体具有添加于其上的1个至3个糖基化位点。

3.如权利要求1所述的α-1抗胰蛋白酶变体，其中，所述特定位点存在于所述N-末端的第3位至第13位之间。

4.如权利要求1所述的α-1抗胰蛋白酶变体，其中，所述特定位点存在于所述N-末端的第9位或第12位。

5.如权利要求1所述的α-1抗胰蛋白酶变体，其中，所述特定位点存在于第4位和第9位、第4位和第12位或第9位和第12位。

6.一种制备α-1抗胰蛋白酶变体的方法，所述方法包括：

a）取代α-1抗胰蛋白酶的N-末端的第1位至第25位之间的特定位点上的氨基酸以添加糖基化位点；

b）在培养基中培养用其上添加有糖基化位点的α-1抗胰蛋白酶表达载体转化的细胞；

c）通过所述细胞表达α-1抗胰蛋白酶变体蛋白；以及

d）纯化并回收表达的α-1抗胰蛋白酶变体蛋白。

7.一种用于预防或治疗α-1抗胰蛋白酶缺乏的组合物，所述组合物包含作为活性成分的α-1抗胰蛋白酶变体，其中，所述α-1抗胰蛋白酶变体通过取代α-1抗胰蛋白酶的N-末端的第1位至第25位之间的特定位点上的氨基酸以添加糖基化位点来制备。

8.如权利要求7所述的组合物，其中，所述α-1抗胰蛋白酶缺乏是慢性阻塞性肺病或肝硬化。

9.一种预防或治疗α-1抗胰蛋白酶缺乏的方法，所述方法包括：

将治疗有效量的α-1抗胰蛋白酶变体给药于患者，其中，所述α-1抗胰蛋白酶变体通过取代α-1抗胰蛋白酶的N-末端的第1位至第25位之间的特定位点上的氨基酸以添加糖基化位点来制备。

10.一种具有增加的体内半衰期的α-1抗胰蛋白酶变体融合物，其中，所述融合物通过连接两个α-1抗胰蛋白酶变体来制备，每个α-1抗胰蛋白酶变体通过取代α-1抗胰蛋白酶的N-末端的第1位至第25位之间的特定位点上的氨基酸以添加糖基化位点来制备。

11.一种包含具有提高的体内半衰期的异质蛋白的α-1抗胰蛋白酶变体融合物，其中，所述融合物通过将α-1抗胰蛋白酶变体连接至所述异质蛋白来制备，并且，所述α-1抗胰蛋白酶变体通过取代α-1抗胰蛋白酶的N-末端的第1位至第25位之间的特定位点上的氨基酸以添加糖基化位点来制备。

12.如权利要求11所述的α-1抗胰蛋白酶变体融合物，其中，所述α-1抗胰蛋白酶变体在第357位具有氨基酸脯氨酸，该脯氨酸进一步被天冬酰胺取代，所述第357位为P2位置。