[发明专利]作为疫苗的HMGB2基因失活的减毒疟原虫

说明书

技术领域

本发明属于医药领域，尤其是防治疟疾。

背景技术

疟疾是由疟原虫(Plasmodium)属的真核单细胞寄生虫引起的传染病。这类寄生虫病出现在世界各地，并在发展中国家中导致严重的经济和健康问题。恶性疟原虫(P.falciparum)是感染人类的5类疟原虫中危害最大的种类。据世界卫生组织(法文缩写为OMS)，恶性疟原虫导致25000至50000万例急性疾病并且每年导致约100万例死亡(尤其是小于5岁的儿童和孕妇)。脑型疟疾是疟疾的一种严重神经性并发症，这类疾病致死病例中的绝大多数都归咎于此。即使个体存活了，脑型疟疾可导致严重的神经性副作用，特别是对于幼儿，其免疫系统尚在形成过程之中。脑型疟疾的发病机制复杂且仍然尚未完全阐明。目前认为，脑型病理可能是在主要器官(脾脏、肺、心脏、肠、肾、肝和脑)的微血管中被寄生的红细胞的隔离(séquestration)以及同样在这些器官中促炎细胞因子产生的结果，造成了可导致个体死亡的全身性综合征和状态。

防治疟疾是OMS的主要挑战之一，但迄今为止，旨在控制这种疾病的所有努力都失败了。在过去三十年中，尽管OMS的数据似乎是令人鼓舞的，但情况已然恶化，这是因为疟蚊(anophèles)对杀虫剂产生抗性并且恶性疟原虫对于抗疟疾药物(即使是组合使用)产生持续增加的化学抗性。

防治疟疾由于缺乏行之有效的抗这种疾病的疫苗而遇到困难。开发疫苗的第一次尝试可追溯到20世纪70年代。自那时以来，出现了越来越多的疫苗试验，而后者面临着寄生虫在其2个连续宿主(人和蚊子)中发育的复杂性，并且还面临着寄生虫逃避免疫系统的异常复杂的机制，其涉及相当高的抗原变异。

这种在寄生虫红细胞内期的变异使得传统的利用疟原虫蛋白质-肽复合物的预防性免疫变得极其困难。由寄生虫的蛋白质生产的疟疾疫苗目前处于临床试验的III期(RTS，S de GlaxoSmithKline Biologicals)。然而，来自II期的结果表明，该疫苗仅可减少35%的临床疟疾发生，且仅可减少49%的严重疟疾的发生。

获得有效对抗寄生虫的红细胞形式的疫苗无论如何仍然是根除疾病中的主要挑战，因为这样的疫苗将既可以减轻症状，又可以减少寄生虫载量和血液中配子体的量，从而减少寄生虫的传播。

最近的研究表明，极低剂量的由恶性疟原虫3D7寄生的红细胞与抗疟疾药物同时给药联合的重复给药诱导了能够保护患者以抵抗同源种属的红细胞内期的免疫(Pombo等人，2002)。

因此，设想利用遗传减毒的活寄生虫(或GAP，“遗传减毒寄生虫”)来诱导长期不育的保护。因此，几种GAP已被公开。然而，大多数的这类GAP经由减毒寄生虫的子孢子而靶向于肝细胞阶段。也已经公开了2个靶向红细胞内期的GAP：其中嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)(Ting等人，2008)或核苷转运蛋白1(NT1)(Aly等人，2010)已被失活的啮齿目动物寄生虫约氏疟原虫(P.yoelii)。已表明，这些GAP所提供的免疫是针对于同源种属的，但也在较小程度上针对于异源种属。然而，使用这些遗传减毒的活寄生虫的疫苗的疗效和无害性仍尚待确认。

因此，现在仍然有必要开发新的策略，以特定地抑制严重攻击的发生，如脑型疟疾的发生，同时也减少寄生虫载量和外周血中配子体的量，从而减少该疾病传播的风险。

发明内容

本发明的目的是提供新的用于预防疟疾的疫苗组合物，尤其是预防疟疾如脑型疟疾的严重攻击的发生。

发明人已经证实，属于疟原虫属的且其hmgb2基因功能已被失活的活寄生虫可以用作疟疾疫苗中的免疫原。实际上，已观察到，施用这种寄生虫在宿主中诱导了免疫反应，其可以清除寄生虫(寄生虫载量低于用显微镜在外周血中检测的阈值)，并有效地和长期地抵御疟原虫的感染，尤其是高致病种属，且尤其是抵御导致疾病症状和传播的寄生虫的红细胞内期。

因此，本发明首先涉及属于疟原虫属且其hmgb2基因功能已被失活的活寄生虫，其用于预防疟疾，尤其是预防具有严重神经性并发症的脑型疟疾。

优选地，本发明的寄生虫用于预防哺乳动物的疟疾或脑型疟疾，尤其是人类。