[发明专利]胰岛细胞的离体成熟

权利要求书

1.用于促进来自断奶前哺乳动物之胰岛细胞成熟的方法，其包括：

a)从断奶前哺乳动物中移出胰腺；

b)将所述胰腺组织减小成大于完整胰岛之大小的碎片，同时保持胰岛处于完全的、产生胰岛素的状态；

c)在蛋白酶溶液中消化所述组织碎片，使得围绕所述胰岛的任何外分泌组织仅部分地与所述胰岛分开；

d)在第一成熟培养基中培养所述经消化的组织；

e)在第二成熟培养基中培养所述经消化的组织；

f)确定所述经培养胰岛的葡萄糖响应度；以及

g)选择有葡萄糖响应的胰岛。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述断奶前哺乳动物是仔猪。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一成熟培养基包含：

a)动物来源的不确定成分；b)抗氧化化合物；c)增强β细胞的葡萄糖依赖性胰岛素分泌的成分；d)维生素B衍生物；f)维生素E衍生物；g)肝素；h)碱性胰腺胰蛋白酶抑制剂；i)丝氨酸蛋白酶抑制剂；和j)脱氧核糖核酸酶。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述第二成熟培养基包含：

a)动物来源的不确定成分；b)抗氧化化合物；c)增强β细胞的葡萄糖依赖性胰岛素分泌的成分；d)维生素B衍生物；f)维生素E衍生物；g)肝素；h)碱性胰腺胰蛋白酶抑制剂；i)丝氨酸蛋白酶抑制剂；和j)脱氧核糖核酸酶，其中所述丝氨酸蛋白酶抑制剂和所述脱氧核糖核酸酶成分的浓度不大于其在所述第一成熟培养基中浓度的一半。

5.根据权利要求3或权利要求4所述的方法，其中所述动物来源的不确定成分为猪血清。

6.根据权利要求3或权利要求4所述的方法，其中所述抗氧化化合物为谷胱甘肽。

7.根据权利要求3或权利要求4所述的方法，其中所述增强β细胞的葡萄糖依赖性胰岛素分泌的成分为Exenatide^TM、胰岛素、胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸钠(ITS)激素、或其组合。

8.根据权利要求3或权利要求4所述的方法，其中所述维生素B衍生物为烟酰胺。

9.根据权利要求3或权利要求4所述的方法，其中所述维生素E衍生物为6-羟基-2，5，7，8-四甲基色满-2-羧酸。

10.根据权利要求3或权利要求4所述的方法，其中所述碱性胰腺胰蛋白酶抑制剂为抑肽酶。

11.根据权利要求3或权利要求4所述的方法，其中所述丝氨酸蛋白酶抑制剂为Pefabloc^TM。

12.根据权利要求3或权利要求4所述的方法，其中所述脱氧核糖核酸酶为链道酶α。