[发明专利]停乳链球菌ID9103以及使用其的透明质酸生产方法

说明书

技术领域

本申请要求于2011年9月30日提交的韩国专利申请第10-2011-100364号的优先权及其权益，在此出于所有目的通过援引将其并入，这等同于在本文完全阐述。 

本发明涉及能够以高产率生产高分子量透明质酸的链球菌属菌株和利用该链球菌属菌株的透明质酸生产方法。更详细而言，本发明涉及登录号为KCTC11818BP的停乳链球菌ID9103菌株和包含对所述菌株进行培养的步骤的透明质酸生产方法。 

背景技术

透明质酸((HA)，Hyaluronan，(C₁₄H₂ONNaO₁₁)_n,(n>1000))是存在于生物体的高分子，其是称作糖胺聚糖的多糖。其具有由交替的D-葡萄糖醛酸和N-乙酰葡萄糖胺通过交替的β-1,3和β-1,4糖苷键而连结在一起的结构。透明质酸为水溶性物质，并且其可用分子量为1000～10000000Da(道尔顿)的宽范围。此外，其具有直链结构。 

具有盐结构的透明质酸体现出优异的效能效果，且由于其保湿效果强，在物理摩擦的状态下显示出强力的润滑作用。此外，透明质酸在诸如针对细菌侵入等的保护等多种效能和性质方面具有极为优良的优点。因此，近来在医学治疗领域已进行了利用透明质酸的开发。这样的优点能够适用于医学补充剂、生物材料和食品，也在医学补给和化妆品方面起着作用。此外，已持续开发了基于透明质酸的新领域。 

为了开发透明质酸，使用了生物组织提取法、微生物培养法。然而，由于鸡冠提取法会导致如病毒侵入、杂质、炎症反应等较多的缺点，因而其中分子量和生产性能得到控制且能够收获高品质的原料的微生物培养生产法近来正在成为主流。特别是最近的趋势是根据由微生物培养而调节和生产得到的透明质酸的分子量范围来决定透明质酸的用途。100,000Da以下的超低分子量透明质酸主要用于食品和化妆品的用途，平均分子量为1,000,000Da的低分子量透明质酸用于开发滴眼液的原料或衍生物，平均分子量为3,000,000～4,000,000Da的透明质酸在用作膝关节注射剂原料时具有较高的价值。 

当然，对于更高分子量范围的透明质酸的极为多样的应用还有很大余地。据预期，其作为膝关节治疗剂以及作为眼科手术佐剂的应用能得到极大地增加。此外，由于体内的许多区域需要超高分子量透明质酸的作用，超高分子量透明质酸可以充分替代传统透明质酸连接材料，后者是通过增加相对低分子量的透明质酸的分子量、粘度或者弹性而得到的。 

可以发现，大多数在韩国申请的主要专利都局限于高分子量透明质酸的发明。韩国注册专利第KR10-0250573号(LG)披露了3,500,000Da的透明质酸的生产，韩国注册专利KR10-0472007(Vacctech,kolon)披露了生产平均分子量为5,500,000Da的透明质酸的技术。在国外大部分(US4784990、JP2058502和EP144019)具有生产4,000,000Da以下的透明质酸的技术。特别是在US6090596的情况中，虽然能生产高分子量的透明质酸，但现实是因极低的生产性和生产方法实际上难以在工业上利用该技术，也无法确保经济效率。 

众所周知，一般而言，广泛开发得到的3,000,000Da～4,000,000Da的高分子量的透明质酸在应用于需要高粘度/弹性的医疗领域中时，在效能/效果方面存在许多不足。为了解决这样的缺点，需要发明一种技术，从而能够经济有效地生产6,000,000Da以上的超高分子量的透明质酸。此外，为了恰当地开发作为具有高附加价值的工业药物的超高分子量透明质酸，应该以最具有创造性的方法来将上述技术发展为具有竞争力和经济效率的技术。 

因此，为了解决上述缺点，需要通过应用具有创造性和经济有效性的微生物培养基组成和大规模生产技术来开发一种能够以高生产性生产高分子量的透明质酸的方法。 

发明内容

技术问题 

因此，本发明人研究了高效地生产高分子量透明质酸的方法，并锁定停乳链球菌ID9103，所述停乳链球菌ID9103是没有透明质酸裂解酶的非溶血性突变株。通过确立了它的最佳培养条件，本发明人完成了本发明。 

因此，本发明的一个目的在于提供登录号为KCTC11818BP的停乳链球菌ID9103菌株。 

本发明的另一个目的在于提供一种透明质酸生产方法，该方法包括在包含碳源以及氮源的培养基中对上述菌株进行培养的步骤。