[发明专利]利用乙酰乙酰辅酶A合酶产生异戊二烯、类异戊二烯前体和类异戊二烯无效
申请号: | 201280048738.4 | 申请日: | 2012-08-03 |
公开(公告)号: | CN104039844A | 公开(公告)日: | 2014-09-10 |
发明(设计)人: | I·S·阿尔多;Z·Q·贝克;M·C·米勒;C·M·派瑞斯 | 申请(专利权)人: | 丹尼斯科美国公司;固特异轮胎和橡胶公司 |
主分类号: | C08F36/08 | 分类号: | C08F36/08;C12P5/00;C12N9/10;C12N9/00 |
代理公司: | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人: | 黄革生;林柏楠 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 乙酰 辅酶 产生 异戊二烯 类异戊二烯 | ||
1.一种能够产生异戊二烯的重组微生物,所述重组微生物包含一种或多种编码能够由丙二酰辅酶A和乙酰辅酶A合成乙酰乙酰辅酶A的多肽的核酸以及一种或多种编码如下多肽的核酸:
a.异戊二烯合酶多肽,其中所述异戊二烯合酶多肽由异源核酸编码;和
b.一种或多种甲羟戊酸(MVA)途径多肽,
其中在合适的培养基中培养所述重组微生物可产生所述多肽以及合成异戊二烯。
2.根据权利要求1所述的重组微生物,其中所述一种或多种编码能够由丙二酰辅酶A和乙酰辅酶A合成乙酰乙酰辅酶A的多肽的核酸为乙酰乙酰辅酶A合酶基因。
3.根据权利要求2所述的重组微生物,其中所述乙酰乙酰辅酶A合酶基因为来自放线菌的基因。
4.根据权利要求3所述的重组微生物,其中所述乙酰乙酰辅酶A合酶基因为来自链霉菌属的基因。
5.根据权利要求4所述的重组微生物,其中所述乙酰乙酰辅酶A合酶基因编码具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列的蛋白质或氨基酸序列与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有80%或更高同一性且具有由丙二酰辅酶A和乙酰辅酶A合成乙酰乙酰辅酶A的功能的蛋白质。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的重组微生物,其中所述异戊二烯合酶多肽为植物异戊二烯合酶多肽或其变体。
7.根据权利要求6所述的重组微生物,其中所述异戊二烯合酶多肽为来自葛属(Pueraria)或杨属(Populus)或杂种银白杨(Populus alba)x欧洲山杨(Populus tremula)的多肽或其变体。
8.根据权利要求7所述的重组微生物,其中所述异戊二烯合酶多肽选自山葛(Pueraria montana)或野葛(Pueraria lobata)、美洲山杨(Populus tremuloides)、银白杨、黑杨(Populus nigra)和毛果杨(Populus trichocarpa)或其变体。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的重组微生物,其中所述一种或多种编码(b)中的一种或多种MVA途径多肽的核酸为异源核酸。
10.根据权利要求1-8中任一项所述的重组微生物,其中所述一种或多种编码(b)中的一种或多种MVA途径多肽的核酸为内源核酸的拷贝。
11.根据权利要求1-10中任一项所述的重组微生物,其中所述一种或多种MVA途径多肽选自(a)将乙酰乙酰辅酶A与乙酰辅酶A缩合以形成HMG辅酶A的酶;(b)将HMG辅酶A转化为甲羟戊酸的酶;(c)将甲羟戊酸磷酸化为5-磷酸甲羟戊酸的酶;(d)将5-磷酸甲羟戊酸转化为5-焦磷酸甲羟戊酸的酶;和(e)将5-焦磷酸甲羟戊酸转化为异戊烯焦磷酸的酶。
12.根据权利要求1-11中任一项所述的重组微生物,其中所述将甲羟戊酸磷酸化为5-磷酸甲羟戊酸的酶选自马氏甲烷八叠球菌(M.mazei)甲羟戊酸激酶、布氏拟甲烷球菌(M.burtonii)甲羟戊酸激酶多肽、乳杆菌(Lactobacillus)甲羟戊酸激酶多肽、清酒乳杆菌(Lactobacillus sakei)甲羟戊酸激酶多肽、酵母甲羟戊酸激酶多肽、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)甲羟戊酸激酶多肽、链球菌(Streptococcus)甲羟戊酸激酶多肽、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)甲羟戊酸激酶多肽和链霉菌(Streptomyces)甲羟戊酸激酶多肽或链霉菌CL190甲羟戊酸激酶多肽。
13.根据权利要求12所述的重组微生物,其中所述将甲羟戊酸磷酸化为5-磷酸甲羟戊酸的酶为马氏甲烷八叠球菌甲羟戊酸激酶。
14.根据权利要求1-13中任一项所述的重组微生物,其还包含一种或多种编码异戊烯二磷酸δ异构酶(IDI)多肽的核酸。
15.根据权利要求1-14中任一项所述的重组微生物,其还包含一种或多种编码一种或多种1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸(DXP)途径多肽的核酸。
16.根据权利要求15所述的重组微生物,其中所述一种或多种编码一种或多种DXP途径多肽的核酸为异源核酸。
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