[发明专利]病毒载体纯化系统有效
申请号: | 201280049032.X | 申请日: | 2012-10-05 |
公开(公告)号: | CN103842501B | 公开(公告)日: | 2017-12-08 |
发明(设计)人: | C.博沃伦塔;A.斯托奈奧洛 | 申请(专利权)人: | 莫尔梅德股份有限公司 |
主分类号: | C12N7/02 | 分类号: | C12N7/02 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司72001 | 代理人: | 罗文锋,李炳爱 |
地址: | 意大*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 病毒 载体 纯化 系统 | ||
1.一种纯化病毒载体的方法,其包括:
ii. 将编码细胞表面标记物的外源基因和感兴趣基因引入包装细胞系,其中所述细胞表面标记物是截短形式的低亲和力神经生长因子受体(∆LNGFR),
iii. 培养这样获得的生产细胞系
iv. 收集含有在其外包膜上携带所述细胞表面标记物的病毒载体颗粒的上清液
v. 将所述上清液与能够结合所述细胞表面标记物的配体孵育
vi. 分离复合物配体-病毒载体
vii. 获得纯化的病毒载体颗粒。
2.权利要求1的方法,其中所述细胞表面标记物的表达是瞬时的。
3.权利要求1或2的方法,其中所述细胞表面标记物的表达是稳定的。
4.权利要求1至2中任一项的方法,其中感兴趣的基因和外源基因在同一个转移载体中表达。
5.权利要求1至2中任一项的方法,其中感兴趣的基因和外源基因在独立的载体中表达。
6.权利要求1的方法,其中所述配体是选自激动剂、拮抗剂、肽、拟肽、抗体、抗体片段的化学或生物学实体。
7.权利要求1的方法,其中所述配体连接至可从上清液分离的结构。
8.权利要求6或7的方法,其中所述配体是与磁珠缀合的抗体,通过对含有复合物抗体-病毒载体的溶液施加磁场获得分离。
9.权利要求8的方法,其中通过除去磁场获得纯化的病毒载体。
10.权利要求1至2中任一项的方法,其中复合物配体-病毒载体的分离在柱上进行。
11.在包装细胞系上表达的外源性细胞表面标记物在纯化由所述包装细胞系制备的病毒载体中的用途,其中所述标记物是∆LNGFR。
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