[发明专利]防止过表达HER2/NEU 的肿瘤的治疗过程中发生逃逸突变的组合物和方法

权利要求书

1.治疗非人动物中表达Her-2/neu的肿瘤生长或癌症的方法，所述方法包括施用包含编码融合多肽的核酸分子的重组李斯特氏菌的步骤，其中所述融合多肽包含与另外的佐剂多肽融合的Her2/neu嵌合抗原。

2.权利要求1的方法，其中所述非人动物是狗。

3.权利要求1的方法，其中给具有表达Her2/neu的肿瘤的对象施用所述融合多肽，防止所述肿瘤中的逃逸突变。

4.权利要求1的方法，其中所述核酸分子包含编码所述免疫原性组合物的第一开放阅读框，其中所述核酸分子位于所述重组李斯特氏菌疫苗株中。

5.权利要求4的方法，其中所述核酸分子进一步包含编码代谢酶的第二开放阅读框，其中所述代谢酶补偿所述重组李斯特氏菌疫苗株的染色体中缺乏的内源基因。

6.权利要求1的方法，其中所述Her2/neu嵌合抗原包含至少5、9、13、14或17个定位的人MHC-I型表位。

7.权利要求4的方法，其中所述核酸分子整合入所述李斯特氏菌基因组。

8.权利要求4的方法，其中所述核酸分子位于所述重组李斯特氏菌疫苗株内的质粒中。

9.权利要求8的方法，其中所述质粒在不存在抗生素选择的情况下稳定地保持在所述重组李斯特氏菌疫苗株中。

10.权利要求8的方法，其中所述质粒不赋予所述重组李斯特氏菌抗生素抗性。

11.权利要求1的方法，其中所述重组李斯特氏菌株是减毒的。

12.权利要求1的方法，其中所述重组李斯特氏菌缺乏ActA致病基因。

13.权利要求1的方法，其中所述另外的多肽是非溶血性LLO蛋白或N末端片段。

14.权利要求1的方法，其中所述另外的多肽是PEST序列。

15.权利要求1的方法，其中所述另外的多肽是ActA N末端片段。

16.权利要求13-15任一项的方法，其中所述另外的多肽与所述Her2/neu嵌合抗原融合。

17.权利要求5的方法，其中由所述第二开放阅读框编码的所述代谢酶是氨基酸代谢酶。

18.权利要求5的方法，其中由所述第二开放阅读框编码的所述代谢酶是丙氨酸消旋酶或D-氨基酸转移酶。

19.权利要求5的方法，其中所述核酸分子进一步包括第三开放阅读框。

20.权利要求19的方法，其中由所述第三开放阅读框编码的所述代谢酶是D-氨基酸转移酶或丙氨酸消旋酶。

21.权利要求1的方法，其中所述重组李斯特氏菌株已经通过动物宿主传代。

22.权利要求1的方法，进一步包含独立佐剂。

23.权利要求22的方法，其中所述佐剂包括粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)蛋白、编码GM-CSF蛋白的核苷酸分子、皂苷QS21、单磷酰脂质A或含有非甲基化CpG的寡核苷酸。

24.权利要求1的方法，其中所述肿瘤是Her2/neu阳性肿瘤。

25.权利要求1的方法，其中所述癌症是表达Her2/neu的癌症。

26.权利要求1的方法，其中所述癌症是骨肉瘤、卵巢癌、胃癌或中枢神经系统(CNS)癌症。

27.权利要求1的方法，其中所述骨肉瘤癌症是犬科动物骨肉瘤。

28.预防非人动物中表达Her-2/neu的肿瘤生长或癌症的方法，所述方法包括施用包含编码融合多肽的核酸的重组李斯特氏菌的步骤，其中所述融合多肽包含与另外的佐剂多肽融合的Her2/neu嵌合抗原。

29.权利要求28的方法，其中所述非人动物是狗。

30.权利要求28的方法，其中给具有表达Her2/neu的肿瘤的对象施用所述融合多肽，防止所述肿瘤中的逃逸突变。