[发明专利]天南星提取物及其用于创伤‑愈合作用的用途

说明书

相关专利申请的交叉引用

本申请要求2011年10月18日提交的美国临时申请系列号No.61/627,772的优先权，将其全部内容通过引用并入本文。

背景技术

天南星(Rhizoma arisaematis，RA)是一种天南星科的多年生草本植物，原产自北美洲和亚洲。在中医学(TCM)中，RA被认为具有苦、辛和温的特性，常用于治疗各种病症，包括咳嗽、肌肉痉挛和癫痫。

创伤愈合是一种复杂的过程，涉及炎症、细胞增殖、组织肉芽形成、上皮再生和组织再生，并且其由角质形成细胞、成纤维细胞、内皮细胞和免疫细胞介导。创伤修复开始于损伤部位的血流增加和血管通透性增加。血液组分渗入创伤中，形成由血小板和细胞外基质(ECM)组成的止血栓子。中性粒细胞还作出非特异性但高度有效的破坏性吞噬应答。新到达的单核细胞和淋巴细胞也介导抗原-特异性免疫应答，其释放额外的促炎细胞因子。

内皮细胞在创伤愈合过程中炎症性应答的初始阶段期间也被活化。除此之外，内皮细胞还表达将循环白细胞附着于炎症细胞的粘附分子。免疫细胞的细胞附着于炎症部位周围内皮细胞衬里的血管，防止免疫细胞扫过(swept past)组织损伤部位；这是免疫细胞随后迁移到周围炎症组织中的一个关键步骤。

内皮细胞也降解现有的血管基底膜，并引发成纤维细胞在创伤区域中的迁移和增殖。增殖的成纤维细胞沿着纤维蛋白凝块迁移到创伤床，并引发称为基质的细胞外基质的形成。一旦基质产生，成纤维细胞产生胶原蛋白、蛋白多糖、纤连蛋白和葡糖胺聚糖，导致在创伤床周围形成新的细胞外基质；新形成的细胞外基质对于其它细胞的迁移是有用的。

与此同时，创伤愈合过程期间形成的肉芽组织覆盖创伤床。另外，角质形成细胞从创伤边缘迁移和增殖，接着成纤维细胞在创伤近端增殖。胶原纤维在表面上再生，包含在肌成纤维细胞中的肌动蛋白将创伤边缘拉近，从而减小了创伤的尺寸。

在创伤愈合期间，角质形成细胞、成纤维细胞和内皮细胞彼此相互依赖地起作用。角质形成细胞迁移和增殖在表皮细胞再生中很重要，表皮细胞再生得到细胞外基质形成的促进。新细胞外基质的合成也由成纤维细胞的增殖所介导，成纤维细胞的增殖促进角质形成细胞的增殖。内皮细胞参与血管生成，其对于向增殖的角质形成细胞和成纤维细胞提供细胞因子、氧和营养物是关键的。内皮细胞也在整个创伤愈合过程中提供免疫保护。

促进内皮细胞、角质形成细胞和/或成纤维细胞的迁移和/或增殖的治疗剂可用于促进创伤愈合，包括急性和慢性创伤(例如，糖尿病性创伤)的愈合。

目前，(贝卡普明)，一种重组人血小板衍生生长因子-BB(rhPDGF-BB)，是FDA批准用于治疗慢性创伤(特别是糖尿病性足部溃疡)的唯一生长因子。需要开发用于创伤愈合的另外的治疗剂。

发明内容

在多个实施方案中，本发明提供天南星(RA)的水和醇提取物、天南星醇提取物的水溶性部位、从天南星分离的化合物(比如，3-O-(9,12-十八碳二烯酰基)-甘油基-β-D-吡喃半乳糖苷、N-(β-D-呋喃核糖-1-基)-苯丙氨酸、和腺苷)，包含前述成分的药物组合物、以及其用于促进创伤愈合的用途。在某些实施方案中，药物组合物为局部剂型，比如乳膏剂、软膏剂、泡沫剂、洗剂、硬膏剂、凝胶或乳剂。

在一个特定实施方案中，本发明提供一种用于促进受试者中创伤愈合的方法，其中所述方法包括向受试者的创伤区域局部施用治疗有效量的药物组合物，该药物组合物包含天南星的水溶性提取物和/或一种或多种从天南星分离的化合物或其盐，其中所述方法促进创伤闭合和/或愈合。

在另一个实施方案中，本发明提供可以从天南星分离的新化合物N-(β-D-呋喃核糖-1-基)-苯丙氨酸。

在某些实施方案中，本发明的天南星提取物和/或从RA分离的化合物可用于促进创伤愈合，包括皮肤创伤、切除伤、撕裂伤、烧伤、擦伤、刺伤或贯通伤、外科创伤、挫伤、血肿、挤压伤和溃疡，比如糖尿病足部溃疡。

附图简要说明

图1A表示天南星(RA)的水提取物在体外闭合成年人角质形成细胞的擦伤创伤。图1B表示治疗后创伤床宽度的定量分析。

图2表示RA的粗提取物(T)和水提取部位(WA)诱导人成年成纤维细胞中I型胶原蛋白的产生。

图3表示RA的粗提取物(T)和水提取部位(WA)不会引起人新生角质形成细胞的细胞死亡。

图4表示如通过MTT(3-[4,5-二甲基噻唑-2-基]-2,5-二苯基四唑鎓溴化物)代谢活性表明的天南星的WA部位的增殖作用。