[发明专利]通过层流进行的维持多能性的单个分散细胞的培养法在审
申请号: | 201280051375.X | 申请日: | 2012-10-22 |
公开(公告)号: | CN103917641A | 公开(公告)日: | 2014-07-09 |
发明(设计)人: | 小寺秀俊;巽和也;横川隆司;多田高;长田翔伍;兴津辉;小此木孝仁;野田雄一郎;中西直之;松村拓;大隅孝志 | 申请(专利权)人: | 爱科来株式会社 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N5/00;C12N5/071;C12N5/0735 |
代理公司: | 北京三友知识产权代理有限公司 11127 | 代理人: | 丁香兰;李洋 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 通过 层流 进行 维持 多能 单个 分散 细胞 培养 | ||
1.一种使多能性细胞单个分散来进行培养的方法,在该方法中,将单个分散的细胞在层流条件下进行培养。
2.如权利要求1所述的方法,其中,将细胞在基质胶上进行培养。
3.如权利要求1或2所述的方法,其中,使胚胎干细胞维持培养基经层流流通。
4.如权利要求3所述的方法,其中,所述胚胎干细胞维持培养基含有纤维原细胞的培养上清。
5.如权利要求1~4的任意1项所述的方法,其中,将细胞在圆筒形容器内进行培养,该圆筒形容器的截面是直径为1mm以下的圆。
6.如权利要求5所述的方法,其中,将细胞在宽0.1mm~1mm、高0.1mm~1mm、长5mm~40mm的容器内进行培养。
7.如权利要求1~6的任意1项所述的方法,其中,所述层流为50μl/分钟以下的流速。
8.如权利要求7所述的方法,其中,所述层流为1nl/分钟以上50μl/分钟以下的流速。
9.如权利要求7所述的方法,其中,所述层流为50nl/分钟以上5μl/分钟以下的流速。
10.如权利要求1~9的任意1项所述的方法,其中,所述层流为在细胞表面产生8×10-3Pa以下的微小剪切应力的流速。
11.如权利要求1~10的任意1项所述的方法,其中,所述层流为在细胞表面产生8×10-5Pa以上的微小剪切应力的流速。
12.如权利要求1~11的任意1项所述的方法,其中,所述多能性细胞为人多能性细胞。
13.如权利要求12所述的方法,其中,所述多能性细胞为胚胎干细胞或人工多能干细胞。
14.如权利要求1~13的任意1项所述的方法,其中,所述层流是由蠕动方式的泵产生的。
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